限制酶作用位点(限制酶作用位点是什么?)

限制酶作用位点是什么?

限制酶识别序列的特点

　　EcoRⅠ切割位点：

　　5'-G AATTC-3'

　　3'-CTTAA G-5' 序列，切割位点在G与A之间，形成黏性末端。

限速酶调控位点

磷酸无糖途径中，6-磷酸葡萄糖脱氢酶是磷酸戊糖途径的限速酶，但是磷酸戊糖途径的调节主要是通过底物和产物浓度的变化实现的。它是一“旁路”。当机体需要NADPH和磷酸核糖的时候，葡萄糖就会流入这一途径。特别是在脂肪酸和固醇合成发生的地方。说白了就是受NADPH/NADP+的调节(代谢产物负反馈调节)NADPH/NADP+比例增高，酶活性被抑制;NADPH/NADP+比例降低，酶活性被激活

限制酶的酶切位点

因为酶切位点的那几个碱基通常是跟模板不匹配的，如果本来就是匹配序列，放在什么位置都可以

酶的调节位点

菌液pcr能出来，说明目的基因已经克隆到载体上。但是，酶切结果条带不符，条带是偏大还是偏小？

假设偏小，那就考虑选择的酶切位点是否合理，设计的酶切位点是一个还是两个，有没有用primer5.0对目的基因进行酶切位点的检测，如果目的基因有这个位点，就不行；如果你根据载体设计，一般载体酶切位点只有一个。因此，酶切位点需要重新考虑。同时还需考虑首末端是否正确，如其他回答的测序也有必要。

限制酶的作用部位是什么

并在每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶，辅因子的需求切位与作用方式，可将限制酶分为三种类型，简称限制酶，分别是第一型（Type I）。

根据限制酶的结构、第二型（Type II）及第三型（Type III）不能，又催化非甲基化的DNA的水解。限制酶又称限制性核酸内切酶，专一对DNA起作用。限制性核酸内切酶是可以识别特定的核苷酸序列。III型限制性内切酶同时具有修饰及认知切割的作用。Ⅰ型限制性内切酶既能催化宿主DNA的甲基化；而Ⅱ型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的水解

限制酶作用在哪里

限制性核酸内切酶特异性地切断DNA链中磷酸二酯键,DNA聚合酶是以一条DNA链为模板,将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链,DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来DNA连接酶不需要模板,解旋酶：是一类解开氢键的酶.DNA限制酶作用于磷酸二酯键DNA连接酶作用于磷酸二酯键DNA聚合酶作用于磷酸二酯键DNA解旋酶作用于氢键

限制酶连接酶等的作用及位点

限制性酶和DNA链接酶作用于磷酸二酯键上，就是脱氧核糖和磷酸之间的 聚合酶，解旋酶作用于氢键 可参照生物书 基因工程和应用 还有DNA复制那块的内容

限制酶的作用位点

需要两分子水，游离的磷酸基团增加两个。限制酶作用于磷酸二酯键，使其断裂。水解一个磷酸二酯键需要消耗一分子水，质粒是环状的双链DNA，在某一位点切割，两条链的磷酸二酯键都要断裂一个，所以需要两分子水，断裂后一条链只有一端有一个游离的磷酸基团，两条链就有两个游离的磷酸基团。

限制酶切位点是指DNA上可供限制酶切割的磷酸二酯键，如果已经切开，便不再是酶切位点了，而是粘性末端或平末端。

一般给出一个碱基序列后，都会标出限制酶切割位点，用箭头标出。

1.限制酶识别一个双链DNA序列，例如AACTGC，然后在特定的部位比如C和T之间切断。

假如这一基因突变了，例如变成ATCTGC，那么限制酶就不能再识别这一序列，称之为“缺乏了某种限制酶的切点”

2.基因突变导致其蛋白质产物发生改变，从而产生疾病

酶的催化位点

酶切位点（Restriction Enzyme cutting site）：DNA上一段碱基的特定序列，限制性内切酶能够识别出这个序列并在此将DNA序列切成两段。

可能存在同尾酶，不同酶的识别序列不同，

有的可能能识别多个酶切位点比如STY1识别序列有WW

限制酶作用的对象和作用的具体部位

DNA聚合酶作用部位是磷酸二酯键。

1、聚合作用：在引物RNA-OH末端，以dNTP为底物，按模板DNA上的指令，即A与T，C与G的配对原则，逐步逐个、连续地将dNTP加到延伸中的DNA分子3'-OH末端，逐步合成延长中的子链DNA。这是DNA聚合酶的主要作用；

2、3’→5’'外切酶活性（校对作用）：这种酶活性的主要功能是从3’→5’方向识别和切除不配对的DNA生长链末端的核苷酸，3’→5’外切酶活性的主要功能是校对作用。当加入的核苷酸与模板不互补而游离时则被3’→5’外切酶切除，以便重新在这个位置上聚合对应的核苷酸，可见，3’→5’外切酶活性对DNA复制真实性的维持是十分重要的。以保证复制过程的保真性和准确性；

3、5’→3’外切酶活性（切除修复作用）：该活性是从5’→3’方向水解DNA延长链前方的DNA链（即只对DNA上双链处的磷酸二酯键有切割作用），主要产生5'—脱氧核苷酸。这种酶活性在DNA损伤的修复中可能起着重要作用。

限制酶作用的部位

因为限制性核酸内切酶是可以识别并附着特定的脱氧核苷酸序列，并对在每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶，简称限制酶。

根据限制酶的结构，辅因子的需求切位与作用方式，可将限制酶分为三种类型，分别是第一型（Type I）、第二型（Type II）及第三型（Type III）。

Ⅰ型限制性内切酶既能催化宿主DNA的甲基化，又催化非甲基化的DNA的水解；而Ⅱ型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的水解。III型限制性内切酶同时具有修饰及认知切割的作用。

扩展资料：

限制性核酸内切酶用途：

1、用于DNA基因组物理图谱的组建；基因的定位和基因分离；DNA分子碱基序列分析；比较相关的DNA分子和遗传工程。

2、限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是提高自身的防御能力.

3、限制酶一般不切割自身的DNA分子，只切割外源DNA。

影响条件：

DNA纯度、缓冲液、温度条件及限制性内切酶本身都会影响限制性内切酶的活性。大部分限制性内切酶不受RNA或单链DNA的影响。

分布区域：

限制性核酸内切酶分布极广，几乎在所有细菌的属、种中都发现至少一种限制性内切酶，多者在一属中就有几十种，例如在嗜血杆菌属中（Haemophilus）现已发现的就有22种。

有的菌株含酶量极低，很难分离定性；然而在有的菌株中，酶含量极高．如E. coli的pMB4(EcoRI酶）和H. aegyptius(Hal Ⅲ酶）就是高产酶菌株。

据报道从10g的H. aegyptius的细胞中，能分离提纯出可消化l0gλ噬茵体DNA的酶量。到目前为止，细菌是限制性内切酶，尤其是特异性非常强的I类限制性内切酶的主要来源。