dna限制酶作用(dna限制酶作用部位)
dna限制酶作用部位
基因工程中，限制酶的切割位点主要取决于限制酶能识别的特定的碱基序列。限制酶一般用于切割含目的基因的DNA片段和切割质粒。切割时需要把握的几个原则：
1.选择限制酶切割质粒，不能把质粒上的标记基因都切掉，最少保留一个标记基因。
2.选择限制酶，一般选择限制酶的识别序列是离质粒上的启动子最近的切割位点的酶。
3.为了避免质粒的自身环化，可以选择双酶切。
dna限制酶作用部位有哪些
细菌容易被噬菌体感染，如已经在每月推荐分子中看到的phix174噬菌体。许多细菌用切割外来DNA的方法进行自我保护，如切割感染性噬菌体的DNA。
这些细菌产生一种能切割DNA的核酸内切酶，一旦发现外来DNA便将其切割，因此它们有效地限制了噬菌体对细菌的感染，故这种核酸内切酶被称为DNA限制酶。
dna酶的作用位点
复制原点DNA复制起点，即DNA聚合酶结合位点标记基因一般是运载体上的一段特殊DNA序列。
能表达特定形状便于检测运载体是否导入受体（如抗氨苄青霉素基因，绿色荧光基因）启动子转录起始位点，即RNA聚合酶结合位点终止子转录终止位点，也是特殊的DNA序列起始密码子（无启动密码子之说）mRNA上翻译起始的位置，通常为AUG，对应甲硫氨酸，少数细菌（属于原核生物）以GUG(缬氨酸)或UUG为起始密码，线粒体和叶绿体以AUG。
AUU、AUA为起始密码子终止密码子翻译终止位置，不对应氨基酸。
UAA,UAG,UGA目的基因插入运载体，就是想要使其表达的那一段DNA序列，比如说想将人生长激素基因导入到小鼠体细胞中使其表达，那么人生长激素基因就是目的基因，经限制性内切酶切后与运载体相连。
dna酶的作用对象
能将两段DNA拼接起来的酶叫DNA连接酶。该酶催化DNA相邻的5′磷酸基和3′羟基末端之间形成磷酸二酯键，使DNA单链缺口封合起来。
大肠杆菌和动植物细胞中都有DNA连接酶。为将限制性酶切片段共价地连接起来，可使用T4DNA连接酶，或大肠杆菌连接酶。T4DNA连接酶是分子量58kD的多肽，是T4噬体感染大肠杆菌而产生的。在连接反应中以ATP为辅助因子，是应用最广的连接酶，有商品供应。它的用途是：
①连接带匹配粘端的DNA分子，②使平端的双链DNA分子互相连接或合成的接头相连接。
大肠杆菌DNA连接酶能使互相匹配的5′突出端和3′突出端的双链DNA连接，反应中以NAD+作为辅助因子，基因工程不常用。
dna限制酶是什么
迄今为止，基因工程中使用的限制酶绝大部分都是从细菌或霉菌中提取出来的，它们各自可以识别和切断DNA上特定的碱基序列。
细菌中限制酶之所以不切断自身DNA，是因为微生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，对于外源入侵的DNA可以降解掉。生物在长期演化过程中，含有某种限制酶的细胞，其DNA分子中或者不具备这种限制酶的识别切割序列，或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。这样，尽管细菌中含有某种限制酶也不会使自身的DNA被切断，并且可以防止外源DNA的入侵。
限制酶在DNA的任何部位都能将DNA切开吗
在实验室工作中，仅用限制性内切酶足以将DNA分子切开。
氢键的作用是维持DNA双链之间的结合，但是单股DNA链的完整性是靠磷酸二酯键联系的，因此，只要破坏磷酸二酯键就能打断DNA链。
dna限制酶的作用部位
一般在人工质粒上对于某种限制酶只设置一个位点，以防止因过度消化而导致质粒断开但是一个质粒上可以同时存在多种限制酶的位点
限制酶和dna连接酶的作用部位相同吗
相同点：成份都是蛋白质，都有催化功能
作用各不相同
限制酶、DNA连接酶、DNA聚合酶作用于DNA的磷酸二酯键，前两者用于基因工程，是剪刀和针线，后者用于DNA的复制过程形成新链用的
逆转录酶和转录酶正好相反，前者是指导RNA上的遗传信息到DNA，后者是指导DNA上的遗传信息到RNA，
解旋酶作用于DNA两条链间的氢键，如A和T之间，C与G之间
RNA聚合酶识别调控序列的结合位点，并与其结合，或者说是识别DNA信息模板链上和启动子
催化DNA转录形成信使RNA，或者说是保证以DNA为模板的进行转录，合成mRNA
它也叫转录酶。
dna限制酶作用部位是什么
因为此酶在原核生物体内是为了切除外源DNA，以免对原核生物遗传表达造成影响
限制酶dna连接酶dna聚合酶的作用部位和作用
DNA水解酶:水解DNA的酶,使其变成脱氧核苷酸DNA聚合酶:合成DNA的酶,DNA聚合酶是将游离的脱氧核苷酸连接到DNA的末端DNA连接酶:连接粘性末端,基因工程使用 ,因为DNA的复制是多起点复制,要将多个冈奇片段连在一起需要DNA连接酶解旋酶:复制或转录是解开DNA的螺旋,解旋酶种类很多，根据不同生物，不同DNA对应不同解旋酶，解旋酶用于DNA双链打开时断裂氢键限制酶:切开DNA特定的碱基序列,基因工程中使用
基因工程中限制酶的作用部位
基因工程中主要的工具酶有限制酶和DNA连接酶。
限制酶的作用是切割目的基因两端，而DNA连接酶是将目的基因和运输体的黏性末端连接在一起。