质粒柱子平衡液作用(液相色谱仪怎么平衡柱子)
液相色谱仪怎么平衡柱子
色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。
色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成,压力不高于70 kg/cm2 时,也可采用厚壁玻璃或石英管,管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效,减小管壁效应,不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度,其效果与抛光相同。还有使用熔融硅或玻璃衬里的,用于细管柱。色谱柱两端的柱接头内装有筛板,是烧结不锈钢或钛合金,孔径0.2~20μm(5~10&μm),取决于填料粒度,目的是防止填料漏出。
色谱是一种分离分析手段,分离是核心
高效液相怎么平衡柱子
在百分之二以内
高效液相色谱仪分析中保留时间不重现有保留时间漂移和保留时间波动两种情况。前者是指保留时间仅沿单方向发生变化,后者指保留时间无固定规律的波动。保留时间漂移的原因有色谱柱平衡、固定相流失、色谱柱污染、流动相组成变化、流动相污染和疏水坍塌等。事实上,保留时间漂移往往是由色谱柱老化引起的。
一、色谱柱平衡:
高效液相色谱中保留时间发生漂移,首先应考虑色谱柱是否已用流动相完全平衡。通常平衡需要10~20倍柱体积的流动相,但如果在流动相中加入少量添加剂(如离子对试剂),则需要相当长的时间平衡色谱柱。
二、固定相流失:
固定相的稳定性都是有限的,即使在推荐的pH值范围内使用,固定相也会慢慢水解。例如硅胶基质在pH = 4时水解稳定性最好。
固定相水解速度与流动相类型和配体有关。双官能团配体和三官能团配体比单官能团配体的键合相稳定,长链键合相比短链键合相稳定,烷基键合相比氰基键合相稳定的多。
经常清洗色谱柱也会加速固定相水解。
三、色谱柱污染:
高效液相色谱柱是非常有效的吸附性过滤器,它可以过滤并吸附流动相携带的任何物质。污染源可以是流动相本身、流
液相色谱仪平衡柱子的目的
反相液相色谱柱是根据溶质、极性活动相和非极性固定相表面间的疏水效应建立的一种色谱形式,
液相色谱仪平衡柱子怎样算平衡
可以用好多种方法,如水平仪等仪器。早时农村工人都会用一根细水管,灌满水后,把一头固定一个高度,另一头从高到低慢慢调整,当水管两头水平衡时,这时两边所指的高度,就一定在一个水平线上。不过现在有更方便的仪器,如红外线仪等,就更放便了。
高效液相色谱柱平衡
固定相的选择对样品的分离起着重要作用,有时甚至是决定性的作用。
不同类型的色谱采用不同的固定相,如气-固色谱的固定相为各种具有吸附活性的固体吸附剂;气-液色谱的固定相是载体表面涂渍的固定液,液相色谱中的固定相为各种键合型的硅胶小球,离子交换色谱中的固定相为各种离子交换剂,排阻色谱中的固定相为各种不同类型的凝胶等等。固定相就是用来分离物质的,流动相就是载体,将物质带到固定相里并通过固定相的流体。在气相里就是栽气,在液相里就是液体,就叫流动相。可以这样理解,固定相是为了把样品里面的成分留下,固定住;而流动相则要把样品的组分带走进检测器。不同的组分的能力不一样导致了组分的分离。流动相是携带样品进入分析流程的物质。固定相是用来分离被测组分的物质。
液相色谱仪怎么平衡柱子位置
一般来说10~20柱体积的平衡就可让色谱柱达到平衡状态。当然,在使用了离子对或者胺类改性剂的体系中,平衡时间需要适当延长,以达到完全平衡的目...
液体柱4.6x250mm 30柱的体积约为124.6ml。
液相色谱柱柱体积计算同圆柱体体积计算
具体计算过程如下:
1.液相色谱柱可以近似地视为圆柱体。圆柱体的体积由公式v=π*r*r*h计算,其中r是液相色谱柱的半径,h是液相色谱柱的长度(即圆柱体的高度)。
2.液相色谱柱的类型为4.6x250mm:内径为4.6mm,半径为2.3mm,长度为250mm,柱容为V3.14,2.3,4152.6立方毫米,转化为4.15265ml,即液柱4.6x250mm的柱体积为4.15265ml不考虑柱的死体积。
3.30柱4.6x250mm液相色谱柱体积为4.15265ml*30124.5795ml,约124.6ml。
液相色谱平衡色谱柱
那个指的是色谱柱的孔径。是个长度单位, 读作“埃”,1埃是 10的 -10 次方米。 一般色谱柱的参数就这几个: C18(5um,4.6mm*250mm,100A) C18-填料 5um-粒径 4.6mm-色谱柱内径 250mm-柱长 100A-孔径 填料的孔径有很多种,比如80埃,100埃,120埃的,还有300埃,可以分析多肽,蛋白质什么的。反正这就是个参数的单位而已。
高效液相色谱怎么平衡柱子
从两个角度看题主所说的化学物质,一个角度考虑流动相里物质的残留,如前面所说,含盐的流动相用完后都需要清洗管路,否则很容易残留,尤其在泵那里,柱子也容易坏。
此外考虑样品中物质残留(此处不分析制备色谱),举个例子吧,分析乳糖(易溶于水,不怎么溶于乙腈)时,用水配置样品,流动相用乙腈:水7:3,所以做多了系统中乳糖就会有残留,故每次分析完样品后可以用水多冲冲。
正相色谱柱平衡
卡套柱的安装(加预柱):
1.将卡套架套入柱芯
2.将两片夹套片嵌入柱芯的凹槽,使夹套高于柱芯()
3.将已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高过夹套片
4.将"子弹头"预柱放入卡套片内
5.将卡套帽和卡套架旋在一起,然后用手拧紧
6.然后依同样的顺序连接好柱子的另一端 平衡色谱柱: 反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。由于色谱柱在储存或运输过程中可能会干掉,因此在用流动相分析样品之前,应使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱;如果您所使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用纯水"过渡"。 硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。如果该色谱柱需要使用含水的流动相,请在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡 注意: 在对NH2改性的色谱柱进行再生时,由于NH2可能成铵根离子的形式存在,因此应该在水洗后用0.1M的氨水冲洗,然后再用水冲洗至碱溶液完全流出。 如果简单的有机溶剂/水的处理不能够完全洗去硅胶表面吸附的杂质,用0.05M稀硫酸冲洗非常有效。 色谱柱的维护: 1. 使用预柱保护分析柱(硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度) 2. 大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2-7.5,尽量不超过该色谱柱的pH范围 3. 避免流动相组成及极性的剧烈变化 4. 流动相使用前必须经脱气和过滤处理 5. 如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相,应在实验完毕柱子冲洗干净,并保存大乙腈中6. 压力升高是需要更换预柱的信号
液相色谱仪柱子方向
打开Excel,鼠标左键单击选中“横坐标轴”,按下快捷键“Ctrl+1”,弹出弹窗。在“大小与属性”中将“自定义角度”调成五十度即可。