无菌过滤纸的作用(灭菌滤纸片作用)
灭菌滤纸片作用
沉淀、过滤能除去水中的颗粒(难溶性)杂质,主要是泥沙、动植物残肢之类的。
消毒不是要除杂质,而是杀灭其中的细菌、单细胞藻类等微生物。
沉淀分静置沉淀和吸附沉淀。静置沉淀主要是将液体中较大的固体颗粒利用其重力而自然沉降下来;吸附沉淀是利用药品与水中物质发生化学反应,生成表面积较大的物质,来吸附水中难溶性固体小颗粒,使其与水分离开来。如在水中加入明矾,明矾与水反应生成胶状物(主要是氢氧化铝),来吸附水中的固体小颗粒,从而使杂质分离出来。
过滤是利用过滤器将水中不溶性杂质与液体分离(或利用物质的溶解性差异,将液体和不溶于液体的固体分离开来的一种方法)。仪器有漏斗、烧杯、玻璃棒、铁架台(含铁圈)、滤纸。
因此,沉淀、过滤能除去水中难溶性杂质。
消毒是指杀死病原微生物、但不一定能杀死细菌芽孢的方法。通常用化学的方法来达到消毒的作用。用于消毒的化学药物叫做消毒剂。
灭菌是指把物体上所有的微生物(包括细菌芽孢在内)全部杀死的方法,通常用物理方法来达到灭菌的目的。
滤纸片用什么方法灭菌
进行正式的抑菌试验方法如下:(1)用灭菌镊子将含药滤纸片按标记位置轻贴在琼脂平板的菌层表面。将平板底朝上置37°C温箱内培养18〜24小时,观察结果并用米尺测量抑菌圈直径大小,参考下表的方法判定细菌对试验药物的敏感性。
(2)本试验须进行无菌和无抗菌药污染操作。
滤纸片法抑菌实验原理
1、培养条件:温度、湿度、培养基PH值。
2、菌液浓度,制板时培养基温度。3、滤纸片中消毒剂的浓度,消毒剂效价等。滤纸片的作用
将滤纸叠放于带有纯水的烧杯底部进行灭菌,灭菌后在超净工作台中从烧杯内拾取滤纸使用,由于烧杯内纯水对滤纸的浮力作用,在拾取滤纸时容易拾取两张或两张以上的滤纸,很难准确成功拾取,既浪费时间,又浪费滤纸,如果在保证无菌环境的情况下将纯水去除,可准确拾取滤纸。
滤纸可以灭菌吗
根据青霉素钠有着抑菌作用来完成青霉素钠的鉴别反应,所以具体的鉴别反应就是抑菌反应。
也就是说通过取适量的青霉素钠产品溶于清水中,在特定环境下如37℃灭活1小时后,把灭菌滤纸片用青霉素钠溶液浸湿,等到试纸上的溶液层现不会漏液的程度就可以将事先准备好的金黄色葡萄球菌放在试纸上,如果在一段时间的培育实验中发现未经灭活的溶液有着一定的抑菌作用,所以就能够完成青霉素钠的鉴别反应。
无菌滤纸片
混合纤维素酯
常见来制成圆形的单面平板滤纸,用以液态和气体的精过滤;
聚丙烯
制成折叠型,常见于筒式过滤器,有比较大的孔径,其具备亲水性的,属粗滤材;
聚偏二氟乙烯
属精滤材,耐热和耐化学比较稳定,蒸汽灭菌承载性良好,可制成亲水性的滤纸,较广泛运用于制药工业无菌制剂使用水及注射用水的过滤;
聚醚砜
制成折叠型,常见于筒式过滤器,耐高温耐水解使用性能好,亲水性的材料,用以精密度较高的溶液的精过滤;
尼龙
制成折叠型,常见于筒式过滤器,亲水性的材料,常见作液态的精过滤;
聚四氟乙烯
制成折叠型,常见于筒式过滤器,疏水性材料,其是应用非常广泛的1种材料,耐热耐化学比较稳定,常见于水、无机溶液及空气的精过滤。
此外,滤材按与水的关联分为亲水性的(水可浸润的)和疏水性(水不浸润)这两种。
灭菌滤纸片作用与用途
利用化学药物渗透细菌的体内,使菌体蛋白凝固变性,干忧细菌酶的活性,抑制细菌代谢和生长或损害细胞膜的结构,改变其渗透性,破坏其生理功能等,从而起到消毒灭菌作用。所用的药物称化学消毒剂。有的药物杀灭微生物的能力较强,可以达到灭菌,又称为灭菌剂。
凡不适于物理消毒灭菌而耐潮湿的物品,如锐利的金属、刀、剪、缝针和光学仪器(胃镜、膀胱镜等)及皮肤、粘膜,病人的分泌物、排泄物、病室空气等均可采用此法。
1.化学消毒灭菌剂的使用原则
(1)根据物品的性能及病原体的特性,选择合适的消毒剂。
(2)严格掌握消毒剂的有效浓度、消毒时间和使用方法。
(3)需消毒的物品应洗净擦干,浸泡时打开轴节,将物品浸没于溶液里。
(4)消毒剂应定期更换,挥发剂应加盖并定期测定比重,及时调整浓度。
(5)浸泡过的物品,使用前需用无菌等渗盐水冲洗,以免消毒剂刺激人体组织。
2.常用化学消毒灭菌方法
(1)浸泡法 选用杀菌谱广、腐蚀性弱、水溶性消毒剂,将物品浸没于消毒剂内,在标准的浓度和时间内,达到消毒灭菌目的。
(2)擦拭法 选用易溶于水、穿透性强的消毒剂,擦拭物品表面,在标准的浓度和时间里达到消毒灭菌目的。
(3)薰蒸法 加热或加入氧化剂,使消毒剂呈气体,在标准的浓度和时间里达到消毒灭菌目的。
适用于室内物品及空气消毒或精密贵重仪器和不能蒸、煮、浸泡的物品(血压计、听诊器以及传染病人用过的票证等),均可用此法消毒。
①纯乳酸 常用于手术室和病室空气消毒。每100m2空间用乳酸12ml加等量水,放入治疗碗内,密闭门窗,加热熏蒸,待蒸发完毕,移去热源,继续封闭2小时,随后开窗通风换气。
②食醋 5-10ml/m3加热水1——2m3,闭门加热熏蒸到食醋蒸发完为止。因食醋含5%醋酸可改变细菌酸碱环境而有抑菌作用,对流感、流脑病室的空气可进行消毒。
此外,尚可应用甲醛或过氧乙酸等进行熏蒸灭菌(详见表5-2)。
(4)喷雾法借助普通喷雾器或气溶胶喷雾器,使消毒剂产生微粒气雾弥散在空间,进行空气和物品表面的消毒。如用1%漂白粉澄清液或0.2%过氧乙酸溶液作空气喷雾。对细菌芽胞污染的表面,每立方米喷雾2%过氧乙酸溶液8ml经30分钟(在18℃以上的室温下),可达99.9%杀灭率。
(5)环氧乙烷气体密闭消毒法将环氧乙烷气体置于密闭容器内,在标准的浓度、湿度和时间内达到消毒灭菌目的。
环氧乙烷是广谱气体杀菌剂,能杀灭细菌繁殖体及芽胞,以及真菌和病毒等。穿透力强,对大多数物品无损害,消毒后可迅速挥发,特别适用于不耐高热和温热的物品,如精密器械、电子仪器、光学仪器、心肺机、起博器、书籍文件等,均无损害和腐蚀等副作用。本品沸点为10.8℃,只能灌装于耐压金属罐或特制安瓿中。
操作方法:灭菌可用柜室法或丁基橡胶袋法。
①柜室法可在环氧乙烷灭菌柜内进行。将物品放入柜室内,关闭柜门,预温加热至40——60℃,抽真空至21kPa左右,通入环氧乙烷,用量1kg/m3,在最适相对温度(60——80%)情况下作用6-12小时。灭菌完毕后排气打开柜门,取出物品。
②丁基橡胶袋法在特制的袋内进行。将物品放入袋内,挤出空气,扎紧袋口。环氧乙烷给药可事先放安瓿于袋内,扎紧袋口后打碎,使其气体扩散;亦可将钢瓶放在40——50℃温水中气化后与袋底部胶管相通,使气体迅速进入,用药量为2.5g/L。将橡胶袋底部通气口关闭,放入20——30℃室温中放置8-24小时。
注意事项
①环氧乙烷应存放在阴凉、通风、无火源、无电开关处。用时轻取轻放,勿猛烈碰撞。②消毒时,应注意环境的相对湿度和温度。钢瓶需加温时,热水不可超过70℃。③消毒容器不能漏气(检测有无漏气,可用浸有硫代硫酸钠指示剂的滤纸片贴于可疑部位。如有漏气,滤纸片由白色变粉红色)。袋内物品放置不宜过紧。④环氧乙烷有一定吸附作用,消毒后的物品,应放置在通风环境,待气体散发后再使用。⑤本品液体对皮肤、眼及粘膜刺激性强,如有接触,立即用水冲洗。⑥在环氧乙烷消毒的操作过程中,如有头昏头痛等中毒症状时,应立即离开现场,至通风良好处休息。
3.消毒剂的性质与消毒水平
(1)高水平消毒剂 杀菌谱广、消毒方法多样,如环氧乙烷、过氧乙酸、甲醛、戊二醛、含氯消毒剂(漂白粉、三合一、次氯酸钠、优氯净等)。高水平消毒剂性质不稳定,需现用现配。
(2)中等水平消毒剂 其特点是溶解度好、性质稳定、能长期贮存,但不能作灭菌剂。如碘伏、碘酒、乙醇、煤酚皂、高锰酸钾等。
(3)低水平消毒剂 性质稳定、能长期贮存,无异味,无刺激性,但杀菌谱窄,对芽胞只有抑制作用。如季胺盐类(新洁尔灭、杜米芬、消毒净)、洗必太等。
4.消毒剂浓度稀释配制计算法
消毒剂原液和加工剂型一般浓度较高,在实际应用中,必须根据消毒的对象和目的加稀释,配制成适宜浓度使用,才能收到良好的消毒灭菌效果。
稀释配制计算公式:C1.V1=C2.V2
C1――稀释前溶液浓度
C2――稀释后溶液浓度
V1――稀释前溶液体积
V2――稀释后溶液体积
滤纸片法抑菌
atcc菌种保藏方法有:
(1)斜面低温保藏。是一种最常用、最简便的菌种保藏方法。首先将需要保藏的菌种接到斜面培养基上,在适宜的温度条下培养,当菌丝健壮地长满斜面时,即将此试管菌种取出,放置于4 ℃的冰箱中保藏。
特点:①简单易行,是目前生产及科研普遍采用的一种方法;②保藏时间短,需6个月转接一次,转管次数多菌丝变异的可能性大;③如改用橡皮塞并用石蜡扣,可保藏1年~3年。
(2)液体石蜡保藏。液体石蜡保藏也称为矿油保藏,即用矿油覆盖试管斜面试管保藏的方法。矿油是指无色、透明、黏稠、性质稳定、不易被微生物分解的石蜡油和液体石蜡,将其覆盖在斜面菌种之上,可以隔绝空气,防治培养基水分蒸发,抑制微生物的代谢活动,推迟细胞老化,从而达到长期保藏菌种的目的。
特点:①方法简便易行,保藏条件不严格,保藏时间长,可作为长期保藏菌种的方法;②菌种必须垂直放,放置不方便。
(3)滤纸保藏。滤纸保藏是一种以无菌滤纸作为菌孢子吸附载体长期保藏菌种的方法,又称滤纸孢子保藏法。
特点:技术要求高,设备费用大,菌种不易衰老退化,菌种保藏时间长很少变异。
(4)自然基质保藏。自然基质保藏就是以不含毒性、刺激性和抑菌性而富含营养的自然生长的基质作培养基来保藏菌种的方法。特点:方法简便易行,保藏时间长。