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elisa的优点及作用(ELISA有何优点)

更新:2022-11-05 20:03编辑:bebe归类:心理健康人气:93

ELISA有何优点

与ELISA相比,IFA检测的优势在于能够确定抗体滴度。

elisa还有哪些方法

Elisa竞争法原理:将已知抗体或抗原固定于固体载相,酶标记待检测的抗原或抗体样本。

Elisa阻断法原理:将已知抗原固定于固体载相,酶标记待检测的单克隆抗体样本。

综上,二者检测方法的区别主要在于酶标记的样本类型。

elisa有哪些用途

正相反。

一般酶和抗体是化学键连接的。阳性对照中,抗体和抗原结合导致抗体的固定化(也就是说结合到板子上了),与抗体连接的酶就一并固定化了,所以再往酶标板中加入底物,酶就发挥作用显色了。阴性对照中,抗原没有,所以抗体不能固定化,随之没有酶的固定化,所以加入底物不显色。

elisa的优点和用途

传染病检测方法现在主要有金标法,酶联法,化学发光法

金标法就是试纸快速检测,优点是速度快,简单操作,成本低,但是缺点也很明显,错误率高,既包括假阳,也包括漏检(这三种方法都有漏检率)

酶联法相对于金标法的进步之处在于s/co值,这个值显示的是显色剂变色的深浅,s是simple样本的英文缩写,co是cut off临界值的英文缩写,一般医院酶联法初筛会设置,阴性,阳性,空白三组对照样本以保证结果准确,实际上酶联法也有数值,只不过单子上没写罢了,只要s/co值低于1就表示为阴性

化学发光法则是三种方法中最先进的,从理论上来说化学发光法的窗口期是短于酶联法的,但是并不明显。

酶联免疫吸附法(ELISA),为手工操作,误差较大,使结果准确性降低。全自动化学发光免疫法具有灵敏度、准确性均高于酶免方法的优点,能定性定量测定。 还可以提高弱阳性标本的检出率。弱阳性标本指感染初期或恢复期患者血液标本。缩小灰区,让临床医生更早了解病人传染病感染情况。

elisa优点及局限性

1. 生物检测法

利用植物激素作用于植物组织或离体器官后产生的特异性反应,从而间接对植物激素的含量进行检测。然而,不同结构的赤霉素、生长素或激动素对不同生物检测法的响应有差异,因此有时可能无法测出。由于生物检测法可以检测植物激素的活性,常用于植物激素的定性分析,也常与其他检测方法结合使用。

2. 气相色谱法

通过与标准样品共色层分离来鉴定样品中植物激素的含量,但由于无法排除杂质与标准品的共色层分离,所以不能准确检测植物激素含量。待测样品必须形成易挥发的甲基化和三甲基硅烷化衍生物才可以运用气相色谱法检测,所以在乙烯的测定种,气相色谱法比较常用。

3. 酶联免疫法(ELISA法)

将抗原或抗体与酶结合形成酶标抗原或抗体,加入酶反应的底物后,底物被酶催化生成有色产物,通过颜色反应的深浅来进行定性或定量分析。酶联免疫吸附法的主要缺点在于抗体的制备复杂,且检测中难以排除交叉反应,无法保证植物激素检测的准确性。

4. 高效液相色谱法

高效液相色谱法与不同检测器结合,能直接分析多种植物激素,是目前应用较广泛的植物激素检测方法之一。除乙烯外的其它植物激素均可以采用高效液相色谱法进行检测。

5. 质谱法

液质联用(LC-MS)和气质联用(GC-MS)克服了高效液相色谱和气相色谱的在植物激素定性和定量方面的局限性,成为普遍接受和认可的植物激素检测方法。GC-MS具有选择性好、专一性强、灵敏度高等特点,不足之处在于对样品的纯化要求很高,且样品需要衍生化处理。不同于GC-MS,LC-MS不需要衍生化处理,简化了操作步骤,缩短了检测时间。因此LC-MS更适用于植物激素的检测(除乙烯外)。

间接elisa和竞争elisa区别

半抑制浓度,或称半抑制率,即IC50,其在间接竞争ELISA标准曲线中是一个非常重要的数据,。而最大检测限就是实际操作中抑制率达到100%时的药物浓度。

检测下限(LOD)对应的OD值:OD(LOD) =B0-3SD

定量限(LOQ)对应的OD值:OD(LOQ) = B0-10SD

elisa有何优点,可用于哪些检测

酶联免疫诊断试剂盒(上海科华的试剂盒)的底物A就是显色剂A(含过氧化氢)为供氢体(DH2),底物B就是显色剂B(含TMB),用于显色。 另外,常用的底物还有:1)AP的底物,常用的为对-硝基苯磷酸脂(PNP),其反应物为黄色的对硝基酚,测读波长为405nm2)GOD的底物,为葡萄糖,供氢体为对硝基蓝四氮唑,反应产物为不溶性的蓝色沉淀 什么是TMB?TMB即四甲基联苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)是一种脂溶性较强的基团,因此容易进入细胞与细胞器中的HRP反应,  且由于这种高度的脂溶性,使其易形成多聚体,在HRP活性部位产生粗大的、深兰色沉淀物,这使得TMB成为组化实验中的一种很好的发色团。同时反应产物的沉淀,使得HRP的活性部位更加暴露,利于酶氧化反应进行。  TMB的反应产物为深蓝色,利于光镜观察,且反应产物越聚越大,常超出单个细胞器的范围(而DAB则被限制在其内),故TMB反应的检测阈较低。  由于上述优点,目前TMB常用于光镜及超微结构水平的HRP及HRP-WGA神经投射的研究。需要注意的是:TMB显色液中的A液和B液应在2h内新鲜配制。另外,TMB是一种较强的皮肤刺激剂,并有致癌的潜在可能,故使用时应带手套及在通风条件下操作。  TMB经HRP作用后共产物显蓝色,目视对比鲜明。TMB性质较稳定,可配成溶液试  剂,只需与H2O2溶液混和即成应用液,可直接作底物使用。另外,TMB又有无致癌性等  优点,因此在ELISA中应用日趋广泛。酶反应用HCL或H2SO4终止后,TMB产物由蓝色呈  黄色,可在比色计中定量,最适吸收波长为405nm。  ABTS虽不如OPD和TMB敏感,但空白值极低,也为一些试剂盒所采用。

elisa几种方法的优缺点

(1)杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断地生产高特异性、高均一性的抗体。

(2)可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体。

(3)由于可能得到“无限量”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法,如IRMA和ELISA等。

(4)由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能,可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗。

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