您当前所在位置:主页 > 四季养生 >

pbs在细胞培养中的作用(细胞用的pbs配制)

更新:2022-11-05 14:12编辑:bebe归类:四季养生人气:53

细胞用的pbs配制

PBS作为生物实验中最常用的试剂,相信很多小伙伴都配置或者实验使用过。PBS是磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline),一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。它具有盐平衡、可调整适宜pH、可以缓冲pH等特点。

PBS、蒸馏水和生理盐水三种溶剂该怎么选择呢?

蒸馏水不具有盐平衡作用,可以破坏生物蛋白的结构及生物特性;而生理盐水不具有调整pH的作用,对完整的、具有活性的物质不能保证其在最适条件下参与生物反应。

在实验室也常见PB、PBST溶液。PB溶液的成分通常有磷酸钠和磷酸钾。若只是化学反应,用PB溶液就行。在PB的基础上按照一定比例加NaCl,就可配置PBS;将磷酸钠和磷酸钾,NaCl,Tween-20按照一定比例,即可配成PBST溶液。

PBS配置过程

第一步,准备洗干净的瓶子和配置PBS所需的纯水。

第二步,根据所需要的PBS浓度确定各成分需要的量,不同实验室要求不一样,所以成分及用量会有区别。以我们细胞部门为例,我们配置的PBS成分如下:

试剂名称g/LKH2PO40.144NaCl9.0Na2HPO40.421

第三步,将称取的药品加入纯水搅拌至完全溶解。

第四步,将溶液pH调整至7.4左右。这里不同实验对溶液pH要求不一样,细胞部门主要是用于胰酶消化细胞,胰酶在偏碱性环境活性会强一点,所以细胞部门的pH可以稍微偏高一点,一般实验使用的话调整pH 7.2-7.4即可。

第五步,将配好的溶液定容到所需的体积,然后高温高压灭菌或者0.22um滤膜过滤除菌。时间充足的小伙伴可以高温高压灭菌,比较着急用的小伙伴可以直接0.22um滤膜过滤,其实效果是一样的。

第六步,等灭菌的PBS温度降下来或者过滤了就是无菌的PBS了,拧紧瓶盖,封上封口膜,就可以放在4度冰箱备用了。

细胞用的pbs配制原理

PBS配置过程

第一步,准备洗干净的瓶子和配置PBS所需的纯水。

第二步,根据所需要的PBS浓度确定各成分需要的量,不同实验室要求不一样,所以成分及用量会有区别。以我们细胞部门为例,我们配置的PBS成分如下:

试剂名称g/LKH2PO40.144NaCl9.0Na2HPO40.421

第三步,将称取的药品加入纯水搅拌至完全溶解。

第四步,将溶液pH调整至7.4左右。这里不同实验对溶液pH要求不一样,细胞部门主要是用于胰酶消化细胞,胰酶在偏碱性环境活性会强一点,所以细胞部门的pH可以稍微偏高一点,一般实验使用的话调整pH 7.2-7.4即可。

第五步,将配好的溶液定容到所需的体积,然后高温高压灭菌或者0.22um滤膜过滤除菌。时间充足的小伙伴可以高温高压灭菌,比较着急用的小伙伴可以直接0.22um滤膜过滤,其实效果是一样的。

第六步,等灭菌的PBS温度降下来或者过滤了就是无菌的PBS了,拧紧瓶盖,封上封口膜,就可以放在4度冰箱备用了。

PBS是我们实验中很常用的试剂,虽然配置比较简单,但也需要用心做好哦,毕竟用心做好每一步是获得一个漂亮的实验结果的前提。

细胞用的pbs配制是什么

1×PBS的浓度是10mm。PBS,全称Phosphate Buffered Saline。在医学词汇中表示磷酸盐缓冲液,用于分子克隆及细胞培养,pH=7.4,与人体血液等渗,主要成分为磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠以及氯化钾。

细胞原代培养pbs的作用

两种缓冲液虽然都很常用,但是本质上还是有些区别的。PBS 溶液的PKa值会随着缓冲液的稀释而变化,而且抑制多数酶的活性,包括激酶,磷酸化酶,脱氢酶等。Tris 受缓冲液的浓度和使用温度的影响。可以参与多种酶反应。

磷酸盐起着缓冲作用的。而氯化钠,起着调节渗透压的作用。一般来说,如果与细胞打交道,应该是pbs。而只是化学反应,可以用pb就行了。

PBS是磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline),一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。它是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液,主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,由于Na2HPO4和KH2PO4它们有二级解离,缓冲的pH值范围很广;而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。如有需要PBS还可以补加1 mmol/LCaCl2和0.5 mmol/LMgCl2,以提供双价阳离子。 注:PBS不是磷酸缓冲液(phosphate buffer solution,PB)。

细胞培养用pbs缓冲液作用

PBS是磷酸盐缓冲液,PBST是磷酸盐吐温缓冲液.

磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffered Saline,简称PBS)的是常用的用于生物学研究的一个缓冲溶液。PBS可以为三种溶液的英文缩写,分别是磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffered solution)、磷酸盐缓冲盐水(phosphate buffered saline)及 磷酸盐缓冲钠(phosphate buffered sodium),其配制方法不同,pH值不同,发挥的生物学作用亦不完全相同。

生物实验中提到的PBST是指PBS溶液加上Tween-20,Tween-20为一种非离子表面活性剂,对细胞生长可产生影响.

细胞培养用pbs的配制

  不是同一种操作。   细胞换液:随着细胞培养时间的的延长,培养基中的营养物被消耗,细胞的代谢产物愈来愈多,尤其是细胞呼吸反应释放出的CO2及其它酸性代谢产物的增加,培养液的pH值越来越低,培养液的颜色越来越黄。此时就需要对细胞进行换液。换液时吸掉旧培养液,用PBS 洗涤细胞一至二次,加入适量的新鲜培养基即可。   细胞传代:随着培养时间的延长和细胞不断分裂,细胞之间相互接触而发生接触性抑制,生长速度减慢甚至停止。此时就需要将培养皿(瓶)中的细胞分成几份,重新接种到另外的培养器皿(瓶)内,再进行培养,这个过程就称为传代。   传代步骤:   1、吸掉旧培养液,用PBS 洗涤细胞一至二次。   2、加入trypsin-EDTA 溶液,37 度作用数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量含血清的新鲜培养基终止trypsin作用,离心后再吸掉上清液。   3、加入适量的新鲜培养基,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,混和均匀后,依稀释比例转移至新的培养瓶中,以正常培养条件培养。

pbs是什么意思细胞培养

PBS是磷酸缓冲盐溶液一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。它是生物化学研究中使用最为广泛的一种缓冲液,主要成分为Na ₂HPO ₄ 、KH₂PO ₄ 、NaCl和KCl。

PBS缓冲液不仅伪狂犬病毒要用它稀释,一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。

由于Na₂HPO ₄ 和KH₂PO ₄ 它们有二级解离,缓冲的pH值范围很广;而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。

如有需要PBS还可以补加1 mmol/L CaCl₂和0.5 mmol/L MgCl₂,以提供双价阳离子。扩展资料PBS是磷酸缓冲盐溶液作用:

1、因为PBS缓冲液具有可调整的适宜pH缓冲作用和盐平衡的作用。不使用蒸馏水的原因在于水会破坏生物蛋白的结构和生物特性。

不使用生理盐水的原因在于它不能够调整PH值。所以,对生物细胞进行清洗首选是PBS缓冲液。2、PBS缓冲液的PH值是细胞最适合的PH值范围,而且在酸碱微量的刺激下,PH值一般也没有任何的变化。

培养基的PH值时很容易变化的,对于细胞具有极大的损伤,但是PBS缓冲液可以保持细胞能在适合的PH值范围之内健康的生活活。

细胞用pbs配方

pbs缓冲液带电:PBS(phosphate buffered solution)即磷酸盐缓冲液,能够提供相对稳定的离子环境和pH缓冲能力,是生物学中经常使用的缓冲盐溶液,用于分子克隆及细胞培养等,pH为 7.4,与人体血液等渗,主要成分为磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠以及氯化钾。

含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)

配制方法为:称取磷酸二氢钾(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),氯化钠(NaCl),氯化钾(KCl),吐温-20 ,加水。

PBS:Phosphate Buffered Saline

PBS 1L配方pH7.4:

磷酸二氢钾(KH2PO4):0.27g,

磷酸氢二钠(Na2HPO4):1.42g,

氯化钠(NaCl):8g,

氯化钾(KCl)0.2g,

加去离子水约800mL

充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调pH至7.4,最后定容到1L。高温高压灭菌后室温保存。 PBS缓冲液(pH7.2~7.4):

NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 10mmol/L, KH2PO4 2mmol/L

PBS缓冲液一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用,具体试剂一般也有不同的比例配方,在针对性上就有了更好的效果。

1x PBS缓冲液就是使用0.1M的PBS配置,可直接使用,2x PBS就是2倍浓度,使用时稀释一倍使用。0.01M的PBS一般不用来配置缓冲液,用于其它用处。

细胞用pbs缓冲液如何配制

含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)配制方法为:

称取磷酸二氢钾(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),氯化钠(NaCl),氯化钾(KCl),吐温-20 ,加水。

PBS:Phosphate Buffered Saline

PBS 1L配方pH7.4:磷酸二氢钾(KH2PO4):0.27g,

磷酸氢二钠(Na2HPO4):1.42g,

氯化钠(NaCl):8g,

氯化钾(KCl)0.2g,

加去离子水约800mL充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调pH至7.4,最后定容到1L

下一篇:八字限运的作用(八字限运是什么意思) 上一篇:注射胶原蛋白有什么副作用(注射胶原蛋白的功效与作用点)