蛋白质的胶凝作用实验(蛋白质的凝胶性实验报告)
蛋白质的凝胶性实验报告
蛋清蛋白在高温下能形成凝胶是因为蛋白质变性造成的。蛋白质在某些物理和化学因素作用下其特定的空间构象被改变,从而导致其理化性质的改变和生物活性的丧失,这种现象称为蛋白质变性。
就是蛋白质表面的一些官能团发生聚合,而另外一些部分发生解旋。
蛋白质凝胶性实验现象
个人觉得,鸡蛋黄 它既是固体,也是液体,同样是流体.
蛋清分离的时候,我明显感觉到蛋黄不会与蛋清混合。分离出来后的蛋黄,是个固体状态,半圆形的固体,只要你力度小一点,甚至可以让蛋黄在手上翻几个来回。但是固体的形态不会持续太久。如果你把一个分离好的蛋黄放到一个盆里,在使劲晃动那个盆,那么蛋黄会改变一种心态,成为流体,随着高低不等时而流动。这种状态下的蛋黄可以称作流体,也可以称为液体,因为不是固体状态下的蛋黄可以放进容器里,随着容器内的空间而变动。所以总的来说,蛋黄是否可以称为,固流液三象性?
蛋白质的变性和凝固实验报告
蛋白质是一种胶体.蛋白质变性是不可逆的,如加热会使蛋白质变性;而蛋白质的沉淀则是可逆的,如在蛋白胶体中加入硫酸钠可使蛋白质盐析沉淀
1.盐析一般是指溶液中加入无机盐类而使某种物质溶解度降低而析出的过程.如:加浓(NH4)2SO4使蛋白质凝聚的过程;在乙酸的酯化反应中加入饱和碳酸钠溶液,降低乙酸乙酯溶解度,使其分层现象更明显的过程.
2.向某些蛋白质溶液中加入某些无机盐溶液后,可以使蛋白质凝聚而从溶液中析出,这种作用叫作盐析.
3.把动物脂肪或植物油与氢氧化钠按一定比例放在皂化锅内搅拌加热,反应后形成的高级脂肪酸钠、甘油、水形成混合物.往锅内加入食盐颗粒,搅拌、静置,使高级脂肪酸钠与甘油、水分离,浮在液面.(该反应用以制肥皂)
蛋白质的凝乳性实验报告
酪蛋白的制备方法: (1)新鲜牛奶脱脂,加酸(乳酸、乙酸、盐酸或硫酸),将pH调至4.8,使干酪素微胶粒失去电荷而凝固沉淀。用这种方法得到的干酪素称为酸酪蛋白,加酸的种类不同得到的酸酪蛋白却几乎毫无区别。酸酪蛋白是白色至淡黄色粉末或颗粒,稍有奶臭和酸味。在水中只是溶胀,若加入氨、碱及其盐时,则可分散溶解于水中。可溶于强酸、二乙醇胺、吗啉、尿素、甲酰胺、热苯酚和土耳其红油。 (2)将牛奶与粗制凝乳酶作用,形成凝固沉淀物,称为粗制凝乳酶酪蛋白,呈白色粒状,几乎无味无臭,加热灼烧会产生特有的臭味。凝乳酶酪蛋白比酸酪蛋白的灰分含量高。 酪蛋白是一种含磷钙的结合蛋白,对酸敏感,pH较低时会沉淀。 酪蛋白是哺乳动物包括母牛,羊和人奶中的主要蛋白质,又称:干酪素、酪朊、乳酪素。 α-酪蛋白是哺乳动物的主要蛋白,人乳中没有α-酪蛋白,以β-酪蛋白为主要酪蛋白形式。酪蛋白对幼儿既是氨基酸的来源,也是钙和磷的来源,酪蛋白在胃中形成凝乳以便消化。
蛋白质的凝胶作用实验现象解释
溶胶或溶液在适当条件下转变为凝胶(冻胶)的过程。可看作溶胶聚沉过程中的一个阶段。胶凝时胶体失去聚结稳定性,但仍有动力学稳定性,是特殊的半固体状态,胶体质点相互联结,形成网状结构,结构空隙中填满液体,不生成沉淀。胶体质点形状不对称和亲水性强时,在强电解质作用下可以发生胶凝。憎水性溶胶在电解质作用下聚沉,但得不到凝胶。
溶胶受改变湿度或加入电解质的影响,失去流动性而成凝胶的作用。例如将明胶溶液冷却,或在硅酸钠溶液中加入酸,都能起胶凝作用而成凝胶。
蛋白质的凝胶作用实验报告
(一)层析柱层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。层析柱的直径大小不影响分离度,样品用量大,可加大柱的直径,一般制备用凝胶柱,直径大于2厘米,但在加样时应将样品均匀分布于凝胶柱床面上。此外,直径加大,洗脱液体体积增大,样品稀释度大。分离度取决于柱高,为分离不同组分,凝胶柱床必须有适宜的高度,分离度与柱高的平方根相关,但由于软凝胶柱过高挤压变形阻塞,一般不超过1米。分族分离时用短柱,一般凝胶柱长20-30厘米,柱高与直径的比较5:1─10:1,凝胶床体积为样品溶液体积的4-10倍。分级分离时柱高与直径之线为20:1─100:1,常用凝胶柱有50×25厘米,10×25厘米。层析柱滤板下的死体积应尽可能的小,如果支掌滤板下的死体积大,被分离组分之间重新混合的可能性就大,其结果是影响洗脱峰形,出现拖尾出象,降低分辩力。在精确分离时,死体积不能超过总床体积的1/1000。
(二)凝胶的选择根据所需凝胶体积,估计所需干胶的量。一般葡聚糖凝胶吸水后的凝胶体积约为其吸水量的2倍,例如SephadexG-20的吸水量为20,1克SephadexG─200吸水后形成的凝胶体积约40ml。凝胶的粒度也可影响层析分离效果。粒度细胞分离效果好,但阻力大,流速慢。一般实验室分离蛋白质采用100-200号筛目的的SephadexG-200效果好,脱盐用SephadexG-25、G-50,用粗粒,短柱,流速快。
(三)凝胶的制备商品凝胶是干燥的颗粒使用前需直接在欲使用的洗脱液中膨胀。为了加速膨胀,可用加热法,即在沸水浴中将湿凝胶逐渐升温至近沸,这样可大大中速膨胀,通常在1-2小时内即可完成。特别是在使用软胶时,自然膨胀需24小时至数天,而用加热法在几小时内就可完成。这种方法不但节约时间,而且还可消毒,除去凝胶中污染的细菌和排除胶内的空气。
(四)样品溶液的处理样品溶液如有沉淀应过滤或离心除去,如含脂类可高速离心或通过SephadexG-15短柱除去。样品的粘度不可大,含蛋白为超过4%,粘度高影响分离效果。上柱样品液的体积根据凝胶床体积的分离要求确定。分离蛋白质样品的体积为凝胶床的1-4%(一般约0.5-2ml),进行分族分离时样品液可为凝胶床的10%,在蛋白质溶液除盐时,样品可达凝胶床的20-30%。分级分离样品体积要小,使样品层尽可能窄,洗脱出的峰形较好。
(五)防止微生物的污染交联葡聚糖和琼脂糖都是多糖类物质,防止微生物的生长,在凝胶层析中十分重要,常用的抑菌剂有:
⑴叠氨钠(NaN3)在凝胶层析中只要用0.02%叠氮钠已足够防止微生物的生长,叠氮钠易溶一水,在20℃时约为40%;它不与蛋白质或碳水化合物相互作用,因此叠氮钠不影响抗体活力;不会改变蛋白质和碳水化合物的层析我特性。叠氮钠可干扰荧光标记蛋白质。
⑵可乐酮[Cl3C-C(OH)(CH3)2]在凝胶层析中使用浓度为0.01-0.02%。在微酸性溶液中它的杀菌效果最佳,在强碱性溶液中或温度高于60℃时易引起分解而失效。
⑶乙基汞代巯基水杨酸钠在凝胶层析中作为抑菌剂使用浓度为0.05-0.01%。在微酸性溶液中最为有效。重金属离子可使乙基代巯基的物质结合,因而包含疏基的蛋白质可在不同程度上降低它的抑菌效果。
⑷苯基汞代盐在凝胶层析中使用浓度为0.001-0.01%。在微碱性溶液中抑效果最佳,长时间放置时可与卤素、硝酸根离子作用而产生沉淀;还原剂可引起此化合物分解;含疏基的物质亦可降低或抑制它的抑菌作用。
蛋白质性质实验一实验报告
加水后没有明显变化 因为蛋白质遇到浓硝酸发生变性,变性后的蛋白质与原来的性质不同 这个实验主要是与蛋白质的盐析进行对比,蛋白质溶液遇到无机盐可能会沉淀析出,但是加水后会重新溶解,蛋白质的性质没有发生变化
蛋白质的凝乳性,粘弹性,胶凝作用实验报告
食品化学对各食品工业技术进步的影响
基础食品工业:面粉改良,改型淀粉及新型可食用材料,高果糖浆,食品酶制剂,食品营养的分子基础,开发新型甜味料及其他天然食品添加剂,生产新型低聚糖,改性油脂,分离植物蛋白质,生产功能性肽,开发微生物多糖和单细胞蛋白质,野生、海洋和药食两用资源的开发利用。
果蔬加工储藏:化学去皮,护色,质构控制,维生素保留,脱涩脱苦,打蜡涂膜,化学保鲜,气调储藏,活性包装,酶促榨汁,过滤和澄清及化学防腐。
肉品加工储藏:宰后处理,保汁和嫩化,护色和护发,提高肉糜乳化力,凝胶性和黏弹性,蛋白质的冷冻变性,超市鲜肉包装,烟薰剂的生产和应用,人造肉的生产,内脏的综合利用等。
饮料工业:速溶,克服上浮下沉,稳定蛋白质饮料,水质处理,稳定带肉果汁,果汁护色,控制澄清度,提高风味,白酒降度,啤酒澄清,啤酒泡沫和苦味改善,啤酒的非生物稳定性的化学本质及防止,啤酒异味,果汁脱涩,大豆饮料脱腥等。
乳品工业:稳定酸乳和果汁乳,开发凝乳酶代用品及再制乳酪,乳清的利用,乳品的营养强化等。
焙烤工业:生产高效膨松剂,增加酥脆性,改善面包呈色和质构,防止产品老化和霉变等。
食用油脂工业:精炼,油脂改性,DHA、EPA和MCT的开发利用,食用乳化剂生产,抗氧化剂,减少油炸食品吸油量等
调味品工业:生产肉味汤料,核苷酸鲜味剂,碘盐和有机硒盐等
发酵食品工业:发酵产品的后处理,后发酵期间的风味变化,菌体和残渣的综合利用等
食品安全:食品中外源性有害成分来源及防范,食品中内源性有害成分消除等。
食品检验:检验标准的制定,快速分析,生物传感器的研制,不同产品的指纹图谱等。
蛋白质凝胶电泳实验报告
western blot是一种非常经典的定性、定量检测蛋白表达的方法。其原理通俗来说:采用聚丙烯酰胺凝胶电泳,蛋白质是被检测物,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。
经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。
以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。
蛋白质的凝胶性实验报告怎么写
1、凝胶成像系统的原理?
样品在电泳凝胶或者其他载体上的迁移率不一样,以标准品或者其他的替代标准品相比较就会对未知样品作一个定性分析。这个就是图像分析系统定性的基础。根据未知样品在图谱中的位置可以对其作定性分析,就可以确定它的成份和性质。
样品对投射或者反射光有部分的吸收,从而照相所得到的图像上面的样品条带的光密度就会有差异。光密度于样品的浓度或者质量成线性关系。根据未知样品的光密度,通过于已知浓度的样品条带的光密度指相比较就可以得到未知样品的浓度或者质量。这就是图像分析系统定量的基础。采用最新技术的紫外透射光源和白光透射光源使光的分布更加均匀,最大限度的消除了光密度不均造成的对结果的影响。
2、凝胶成像的适用范围?
1.蛋白质、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分离纯化结果作定性分析。
2.可以确定生物分子的分子量。
3.可以应用于生物分子的定量分析中。
3、凝胶成像一般操作步骤?
1.打开凝胶成像系统开关。
2.打开电脑,系统自动打开并进入成像软件。
3.打开凝胶成像系统前面板,选择使用紫外透射光源或者白光透射光源,将相应光源安放到位。
4.将样品放置在透射光源的样品台上。
5.在成像操作界面里面选择使用Upper white光源,点击绿色(即时成像)按钮。
4、是不是像素越高,产品就越好?
像素是要针对成像设备来看的,比如数码相机与CCD的像素就不具备可比性,其次CCD本身的质量比单纯的像素高低更重要。对于同级别CCD最重要的指标是其大小,也就是CCD尺寸,尺寸越大其本身价值就成几何倍地增长。
5、配件紫外反射灯源的主要用途为何?
紫外反射灯源使用并不广泛,主要是提供非透明材质的DNA跑胶载体如纸层析等的成像需要而使用。由于比较常用的还是透明的琼脂糖凝胶与聚丙烯酰胺凝胶,透射光源完全可以满足,因此将紫外反射光源作为选配件不列入标配中。
6、为何要采用自动变焦镜头,有何意义?
自动变焦镜头无需手动调节,可操作性强,同时也减少了EB潜在的污染机会。再者使得将CCD内置成为了可能,从而达到防灰防尘防震的目的,更好地保护了核心部件延长产品的使用寿命。
7、如何看待CCD的一些主要技术参数?
CCD的主要技术参数有CCD尺寸,有效像素,信噪比,采集位数等。其中CCD尺寸与信噪比都是影响成像的关键因素,尺寸越大能接受的信号就越多。而热噪音越低,信噪比就越高,成像质量也就越好。采集位数指色彩灰度的表达范围。如采集位数为8则表示有2的8次方数量的灰度来还原色彩。
8、紫外对人体有伤害,是否具有防护措施?
紫外对人体,特别是眼睛有一定伤害,TOCAN凝胶成像系统具备紫外防护设施,在紫外灯开启的状态下,如不慎打开暗箱,紫外灯会自动熄灭防止对人体的伤害。
9、能否在凝胶成像上直接切胶?
TOCAN凝胶成像可以,如需直接切胶,首先按系统中间的观察窗,打开装有进口防紫外玻璃的观察窗口,然后打开左右两侧专为割胶所设计的小门,即可进行切胶操作。
10、如何调节焦距 聚焦 光圈以获得高质量的图片?
三个最重要的可调参数分别是焦距 聚焦和光圈。其中焦距调节清晰度,聚焦调节图像大小,光圈调节明暗。一般先把光圈调节到适宜的亮度后,再调节聚焦将图像放到最大,最后调解焦距,在图像较大的情况下焦距比较容易调节到最清晰状态,然后再把图像缩放在适宜大小后成像即可