高渗再生培养基作用(高渗培养基配制)

高渗培养基配制

L型菌需在高渗低琼脂(0．8％～0．9％)的含血清(20％)培养基中培养，生长缓慢，一般生长期为2～7天，菌落为"油煎蛋"状，需放大100倍左右才能看到菌落，可通过传代培养而返祖。

L型细菌即细菌细胞壁缺陷的细菌，因其首先由李斯特(ListEr)研究院所发现，故取其第一个字母而称之。 细菌细胞壁的主要成分是肽聚糖，由于受作用于细胞壁的抗生素、溶菌酶等因素的影响，当肽聚糖结构遭受破坏或其合成受到抑制时，虽然大多数细菌裂解死亡，但有时也有一些细菌不死，这些细菌即L型菌。

低渗培养基

因为如果在低渗溶液中的话，因为渗透作用，水分会过多地进入原生质体，有可能会导致原生质体破裂，故需要在等渗或高渗溶液中制备。

高渗培养基是什么培养基

培养基的种类有：

1）基础培养基：含有基础生长所需的基本营养成分，最常用的是肉浸液，俗称肉汤，主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。基础培养基广泛用于细菌的增菌、检验，也是制备其他培养基的基础成分。

（2）营养培养基：在基础培养基中可加入葡萄糖、血液、生长因子等特殊成分，供营养要求较高的细菌和需要特殊生长因子的细菌生长。最常用的是血琼脂平板、巧克力血平板等。

（3）鉴别培养基：利用细菌分解糖类和蛋白质的能力及其代谢产物的不同，在培养基中加入特定的作用底物和指示剂，观察细菌生长过程中分解底物所释放的不同产物，通过指示剂的反应不同来鉴别细菌。例如糖发酵管、克氏双糖铁琼脂（KIA）、伊红-亚甲蓝琼脂和动力-吲哚-尿素（MIU）培养基等。

（4）选择培养基：在培养基中加入抑制剂，去抑制标本中的杂菌生长，有助于所选择的细菌种类的生长。例如培养肠道致病菌的SS琼脂，其中的胆盐能抑制革兰阳性菌，枸橼酸钠和煌绿能抑制大肠埃希菌，因而使致病的沙门菌、志贺菌容易分离到。

（5）特殊培养基：包括厌氧培养基和细菌L型培养基等。前者是培养专性厌氧菌的培养基，除含营养成分外，还加入还原剂以降低培养基的氧化还原电势，如疱肉培养基、巯基乙醇酸钠培养基等。后者是针对细胞壁缺损的细菌L型，由于胞内渗透压较高，故培养基必须采用高渗低琼脂培养基。

高渗培养基的特点

1.营养物质

包括水分、含碳化合物、含氮化合物、无机盐类和生长因子等。不同细菌对营养的需求不尽相同，有的细菌只需基本的营养物质，而有的细菌则需加入特殊的营养物质才能生长繁殖，因此，制备培养基时应根细菌的类型进行营养物质的合理搭配。

2.温度

细菌只能在一定温度范围内进行生命活动，温度过高或过低，细菌生命活动受阻乃至停止。根据细菌对温度的需求不同，可将细菌分为嗜冷菌、嗜温菌和嗜热菌三类，病原菌属于嗜温菌，在15~45°C都能生长，最适生长温度是37°C左右，所以实验室培养细菌常把温箱温度调至37°C。

3.PH

培养基的pH对细菌生长影响很大，大多数病原菌生长的最适pH为7.2~7.6，但个别偏酸，如鼻疽假单跑菌需pH为6.4~6.6,也有的偏碱，如霍乱孤菌需pH为8.0~9.0。许多细菌在生长过程中，能使培养基变酸或变碱而影响其生长，所以往往需要在培养基内加入一定的缓冲剂。

4.渗透压

细菌细胞需在适宜的渗透压下才能生长繁殖。盐腌、糖渍之所以具有防腐作用，即因一般细菌和霉菌在高渗条件下不能生长繁殖之故。不过细菌较其他生物细胞多渗透压有较强的适应能力，特别是有一些细菌能在较高的食盐浓度下生长。

5.气体

细菌的生长繁殖与氧的关系十分密切，在细菌培养时，氧的提供与排除要根据细胞的呼吸类型而定。少数细菌培养时需要二氧化碳等其他气体

高渗再生培养基

细菌L型就是革兰阳性菌细胞壁受损或缺失，仍能够生长和分裂的细菌。也称为细菌细胞壁缺陷型。

主要特征是：

1、细菌L型大多染成革兰阴性。

2、细菌L型难以培养，其营养要求基本与原菌相似，但需在高渗低琼脂含血清的培养基中生长。

3、细菌L型生长繁殖较原菌缓慢。

4、细菌L型的形态因缺失细胞壁呈高度多形性，大小不一，有球形、杆状和丝状等。

5、去使细胞壁受损的除诱发因素后，有些L型菌可回复为原菌，有些则不能回复。

高渗培养和普通培养

细菌L型在体内或体外、人工诱导或自然情况下均可形成，诱发因素很多，如溶菌酶（lysozyme）、溶葡萄球菌素（lysostaphin）、青霉素、胆汁、抗体、补体等。萊垍頭條

其中溶菌酶和溶葡萄球菌素能裂解肽聚糖中N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸之间的β-1,4糖苷键，破坏聚糖骨架。青霉素能与细菌竞争合成肽聚糖过程中所需的转肽酶， 抑制四肽侧链上D-丙氨酸与五肽桥之间的联结，使细菌不能合成完整的肽聚糖。人与动物细胞无细胞壁，也无肽聚糖结构，故溶菌酶和青霉素对人体细胞无破坏作用。萊垍頭條

细菌L型的形态因缺失细胞壁呈高度多形性，大小不一，有球形、杆状和丝状等。着色不匀，无论其原为革兰阳性或阴性菌，形成L型大多染成革兰阴性。细菌L型难以培养，其营养要求基本与原菌相似，但需在高渗低琼脂含血清的培养基中生长。垍頭條萊

细菌L型生长繁殖较原菌缓慢，一般培养2～7天后在软琼脂平板上形成中间较厚、四周较薄的荷包蛋样细小菌落，也有的长成颗粒状或丝状菌落。萊垍頭條

L型在液体培养基中生长后呈较疏松的絮状颗粒，沉于管底，培养液则澄清。去除诱发因素后，有些L型可回复为原菌，有些则不能回复，其决定因素为L型是否含有残存的肽聚糖作为自身再合成的引物。垍頭條萊

高渗培养是什么检查

可以对比参考文献，比如赵辉等《氯化钠胁迫下模式植物狗尾草种子萌发期抗盐性鉴定与评价指标研究》 根据氯化钠高渗培养基培养法,选择1/2 MS和MS两种基本培养基,分别设计了0、100、200、300、400、500 mmol/L 6个梯度,对狗尾草ME34品系种子萌发期的抗盐性进行了鉴定。