细胞冻存时dmso的作用(细胞冻存用DMSO)
细胞冻存用DMSO
DMSO一般用于细胞冻存保护剂和药物溶剂。
用作细胞保护剂的机理是，DMSO能在细胞膜上打洞，使细胞内的水分子能渗透出来，从而防止细胞冷冻过程中在细胞内形成冰晶、破坏细胞结构。过高浓度的DMSO会对细胞造成损伤，一般冻存操作采用的终浓度是10％。
其用作药物溶剂时，需要考虑DMSO具有诱导白血病细胞向红系分化和抑制某些细胞增殖的作用，可根据实验用的细胞类型做文献调研（一般建议低于0.5%），摸索合适的DMSO的用量。
细胞冻存用什么培养基
步骤:
1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的冻存培养液；
2. 取对数生长期的细胞，去除旧培养液，用PBS清洗。
3. 去除PBS，加入适量胰蛋白酶（覆盖培养皿表面）把单层生长的细胞消化下来；
4. 离心1000rpm，5min；
5. 去除胰蛋白酶，加入适量配制好的冻存培养液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml～1×107/ml；
6. 将细胞分装入冻存管中，每管1～1.5 ml；
7. 在冻存管上标明细胞的名称，冻存时间及操作者；
8. 冻存：标准的冻存程序为降温速率-1～-2℃/ min；当温度达-25℃以下时，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃时，则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中过夜，取出冻存管，移入液氮容器内。
细胞冻存用DMSO与配药用DMSO区别
动物实验中如何解决药物水溶性问题 DMSO是一种细胞保护剂，它的作用机理是在细胞膜上打洞，使细胞内的水分子能渗透出来，从而防治冷冻细胞时，细胞内冰晶的形成，而破坏细胞。所以在做细胞冻存时它是必不可少的，但DMSO又能损伤细胞使用它时需要有一定浓度，一般采用的是终浓度10％就行了。最大浓度药物的DMSO含量是0一般来说，培养基中浓度为小于0.5%就可以了，但据实验观察小于0.25%肯定没有问题。相关要求不超过1%
细胞冻存有什么用
一般培养细胞在-80摄氏度（低温冰箱）或-196摄氏度（液氮）中储存，-80只能短期储存，液氮中一般能够保存一年以上。在这样的温度下细胞的所有生物代谢活动几乎完全停止，酶和各种蛋白质的活性为零，活细胞处于静止的状态，但并不破坏细胞膜的完整和蛋白质的结构。温度快速回升后，细胞能够继续存活。
细胞冻存用的盒子
1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的冻存培养液；
2. 取对数生长期的细胞，去除旧培养液，用PBS清洗。
3. 去除PBS，加入适量胰蛋白酶（覆盖培养皿表面）把单层生长的细胞消化下来；
4. 离心1000rpm，5min；
5. 去除胰蛋白酶，加入适量配制好的冻存培养液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，计数，调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml～1×107/ml；
6. 将细胞分装入冻存管中，每管1～1.5 ml；
7. 在冻存管上标明细胞的名称，冻存时间及操作者；
8. 冻存：标准的冻存程序为降温速率-1～-2℃/ min；当温度达-25℃以下时，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃时，则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中过夜，取出冻存管，移入液氮容器内。
细胞冻存用的DMSO有区别么
细胞冻存是细胞培养、引种、保种和保证实验顺利进行的重要技术手段。
在细胞建株和建系中，及时冻存原始细胞是十分重要的。在杂交瘤单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞、每次克隆化得到的亚克隆细胞的冻存保种常常是必不可少的实验操作。因为在没有建立一个稳定的细胞系或稳定分泌抗体的细胞系的时候，细胞的培养过程中随时可能因细胞的污染、分泌抗体能力的丧失或遗传变异等等导致实验失败，如果没有原始细胞的冻存，则因为上述的意外而前功尽弃。索莱宝细胞冻存常用冻存液的成分如下：20％血清（FBS）、10％DMSO、70％1640培养液；或90％血清（FBS）、10％DMSO，更可防止细胞内冰晶形成。将DMSO和FBS加入DMEM中，各自含量占总体积的10%，然后滤膜过滤后分装保存备用。细胞冻存用多少血清
1、培养瓶：如果你们是实验室小规模一般选50ML100ML250ML。
2、玻璃吸管：长25-30CM玻璃器皿总是摔断所以稍稍长一点比较好。
3、玻璃瓶：培养基可以买胰酶的配置需要的成本很低所以准备两三个150ML的瓶子自己配就行了。配置胰酶需要购买一种过滤器。
4、EP管：4ML的塑料管冻存管这些塑料的管子是必须的。
5、移液枪：（各种型号都要一把吧）这个不算是耗材但是枪头是耗材。
6、细胞培养板（我们自己常用的有96空、24孔、6孔，当然还有其他的规格，可以根据需要选择）。
7、培养基：如果自己配置的话要买一些蓝盖的瓶子，一般规格会有1000ml、500ml、250ml、100ml的，也要买一些装血清的血清瓶，10ml的玻璃试管也要买一些脱脂棉、纱布、酒精灯、镊子，一次性橡胶手套、口罩、帽子、鞋套也需要准备稍稍说下实验的硬件：培养箱（记得买二氧化碳钢瓶）倒置显微镜低速离心机冰箱液氮罐有这些东西基本就可以进行实验了根据实验的需要再考虑买其他物品
细胞冻存用异丙醇
异丙醇易挥发，并且容易吸收空气中的水分，所以在冷冻细胞的过程中可以辅助实现缓慢降温，直接从室温放进-80可以达到近似于1度/分钟。
细胞冻存用血清还是培养基
细胞冻存的步骤：
1、选择活力好，密度约80%的细胞，此时细胞处于对数生长期，比较适合冻存。细胞冻存依旧分为贴壁细胞冻存和悬浮细胞冻存。
2、显微镜下观察细胞状态,若细胞密度较高，培养基变黄，需要换液4h之后再进行冻存操作，细胞长满后，将培养皿中的培养基用枪小心的吸去。再用PBS冲洗一到两次,尽量吸干净润洗的PBS，加入胰酶消化细胞,消化一定要注意控制胰酶作用时间，消化细胞时由于每个细胞贴壁性不一样，消化时间差别会很大,胰酶消化是需要比较精细的操作，既要充分消化下细胞打散成单细胞悬液，均匀接种，又要避免消化过度造成细胞严重受损。大家用的胰酶活力及消化步骤、试剂都是不一样的，所以不能完全规定消化时间，一般仪个人经验为准。
对于消化这步，建议按照下述操作：胰酶首先复温到室温后加入细胞，放入37℃培养箱，然后每隔30秒，吹打下细胞，如果能够吹打散细胞，说明细胞消化完成可以终止消化，之后混匀细胞时尽量轻柔，不要产生过多气泡。如果30秒不能分散，则再等30秒重复操作。
3、消化完成后加6-8ML完全培养基终止消化，混匀细胞，收集细胞悬液。
4、900-1000rpm离心3分钟，弃上清,加入配制好的冻存培养液，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，将细胞分装入冻存管中，每管1～1.5 ml,在冻存管上标明细胞的名称，冻存时间及操作者,装有细胞的冻存管放入-4℃冰箱10分钟 ，然后放入-80℃冰箱中过夜，取出冻存管，移入液氮容器内。
5、24小时后取出一只冻存管复苏，检查活性及是否污染。