ecori限制酶作用点(EcoRI酶)
EcoRI酶
基因工程操作中涉及一系列相互关联的酶促反应。已经知道有许多重要的核酸酶,如限制性内切核酸酶、外切核酸酶、DNA连接酶、DNA聚合酶、反转录酶、DNA及RNA的修饰酶等,在基因工程的操作中有着广泛的用途。
1.限制性内切核酸酶
限制性内切核酸酶(restrictionendonuclease)是一类能识别双链DNA中特殊核苷酸序列,并在合适的条件下使每一条链一定位点上的磷酸二酯键断开,产生具有3/—OH基团和5/—P基团的DNA片段的内切脱氧核糖核酸酶(endo-deoxyribonuclease)。至今发现的限制性内切核酸酶有I型酶、Ⅱ型酶和Ⅲ型酶,它们各具特性。基因工程中所说的限制性内切核酸酶都是指Ⅱ型酶。
限制性内切核酸酶把目的基因从只有四种碱基A、T、G、C组成的DNA长链(人类DNA长度为3X109个碱基对)中准确地剪切下来。每一种限制性内切核酸酶的识别位点是固定的,如EcoRI的识别位点是GAATTC及其互补序列CTTAAG。
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EcoRI酶说明书
Ecori1切割的是黏性末端
ecori是什么酶
限制酶的来源一般考虑原核生物。
限制性核酸内切酶分布极广,几乎在所有细菌的属、种中都发现至少一种限制性内切酶,多者在一属中就有几十种,例如在嗜血杆菌属中(Haemophilus)现已发现的就有22种。有的菌株含酶量极低,很难分离定性;然而在有的菌株中,酶含量极高.如E. coli的pMB4(EcoRI酶)和H. aegyptius(Hal Ⅲ酶)就是高产酶菌株。据报道从10g的H. aegyptius的细胞中,能分离提纯出可消化l0gλ噬茵体DNA的酶量。到目前为止,细菌是限制性内切酶,尤其是特异性非常强的I类限制性内切酶的主要来源。
EcoRI酶切大肠杆菌总DNA的酶切体系
限制性内切酶,能够特异性切割特定的回文序列restrictionsitesHindIIIandEcoRI就是指HindIII和EcoRI的限制性酶切位点
ecori酶识别序列
我想你说的应该是DNA中的非对称序列,其可能出现的场合如下:
最常见的Ⅱ型限制性内切酶在特异性识别序列内部切割 DNA,如 HhaI、HindIII 和 NotI,商业化酶多属此类。它们一般以同源二聚体的形式结合到 DNA 上,识别对称序列;但也有少量的酶与DNA 结合形成异二聚体,识别非对称序列(如 BbvCI 识别 CCTCAGC)。一些酶识别连续性序列(如 EcoRI 识别 GAATTC,其中的两个半识别序列是相连的);而另一些识别非连续性序列(如 BglI 识别GCCNNNNNGGC,其中的两个半识别序列是不相连的)。
EcoRi酶切割形成的末端怎么写
意思染色体上一个基因或者标记的位置。位点有时特指DNA上有表达功能的部分。
优势效应
某些限制性内切酶对同一底物的不同位点切割效率不同,这种现象被称为内切酶的位点优势效应。1975年,Thomas和Davis发现EcoRI并不是随机切割λDNA分子上的5个识别位点,其中对λDNA右侧位点的切割速率比中间位点快10倍。
EcoRI酶怎么读
因为限制性核酸内切酶是可以识别并附着特定的脱氧核苷酸序列,并对在每条链中特定部位的两个脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键进行切割的一类酶,简称限制酶。
根据限制酶的结构,辅因子的需求切位与作用方式,可将限制酶分为三种类型,分别是第一型(Type I)、第二型(Type II)及第三型(Type III)。
Ⅰ型限制性内切酶既能催化宿主DNA的甲基化,又催化非甲基化的DNA的水解;而Ⅱ型限制性内切酶只催化非甲基化的DNA的水解。III型限制性内切酶同时具有修饰及认知切割的作用。
扩展资料:
限制性核酸内切酶用途:
1、用于DNA基因组物理图谱的组建;基因的定位和基因分离;DNA分子碱基序列分析;比较相关的DNA分子和遗传工程。
2、限制性核酸内切酶是由细菌产生的,其生理意义是提高自身的防御能力.
3、限制酶一般不切割自身的DNA分子,只切割外源DNA。
影响条件:
DNA纯度、缓冲液、温度条件及限制性内切酶本身都会影响限制性内切酶的活性。大部分限制性内切酶不受RNA或单链DNA的影响。
分布区域:
限制性核酸内切酶分布极广,几乎在所有细菌的属、种中都发现至少一种限制性内切酶,多者在一属中就有几十种,例如在嗜血杆菌属中(Haemophilus)现已发现的就有22种。
有的菌株含酶量极低,很难分离定性;然而在有的菌株中,酶含量极高.如E. coli的pMB4(EcoRI酶)和H. aegyptius(Hal Ⅲ酶)就是高产酶菌株。
据报道从10g的H. aegyptius的细胞中,能分离提纯出可消化l0gλ噬茵体DNA的酶量。到目前为止,细菌是限制性内切酶,尤其是特异性非常强的I类限制性内切酶的主要来源。