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色谱柱作用(柱色谱的作用)

更新:2022-10-23 04:03编辑:bebe归类:美容美体人气:97

柱色谱的作用

1、方法不同

柱色谱又称层析法。是一种以分配平衡为机理的分配方法。

薄层色谱是在被洗涤干净的玻璃(10×3cm左右)上均匀的涂一层吸附剂或支持剂,待干燥、活化后将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一端约1cm处的起点线上,晾干或吹干后置薄层板于盛有展开剂的展开槽内,浸入深度为0.5cm。

待展开剂前沿离顶端约1cm附近时,将色谱板取出,干燥后喷以显色剂,或在紫外灯下显色。

2、原理不同

柱色谱包含两个相,一个是固定相,一个是流动相。当两相相对运动时,反复多次地利用混合物中所含各组分分配平衡性质的差异,最后达到彼此分离的目的。

薄色谱法的基本原理是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能的不同,或和其它亲和作用性能的差异,使混合物的溶液流经该种物质,进行反复的吸附或分配等作用,从而将各组份分开。

色谱柱作用是什么

气相色谱柱分填充柱和毛细管柱,填充柱可供选用的固定相种类多,毛细管柱柱效功率高。

柱色谱有哪些用途

1、吸附柱色谱

吸附色谱的原理:在一定条件下,硅胶与被分离物质之间产生作用,这种作用主要是物理和化学作用两种.物理作用来自于硅胶表表面与溶质分子之间的范德华力.化学作用主要是硅胶表面的硅羟基与待分离物质之间的氢键作用。

色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管,下端用棉花或玻璃纤维塞住,管内装入吸附剂。吸附剂的颗粒应尽可能保持大小均匀,以保证良好的分离效果。除另有规定外,通常多采用直径为0.07~0.15mm的颗粒。色谱柱的大小,吸附剂的品种和用量,以及洗脱时的流速,均按各品种项下的规定。

2、分配柱色谱

方法和吸附柱色谱基本一致。装柱前,先将载体和固定液混合,然后分次移入色谱柱中并用带有平面的玻棒压紧;供试品可溶于固定液,混以少量载体,加在预制好的色谱柱上端。洗脱剂需先加固定液混合使之饱和,以避免洗脱过程中两相分配的改变。

柱色谱的用途

凝胶色谱法是用来分离蛋白质的。分蛋白质分子小的进入凝胶内部。路程比较长,移动速度比较慢。而相对分子质量比较大的蛋白质只被排除于凝胶颗粒之外。路程比较短,移动速度比较快。这样相对分子质量,不同的蛋白质分子就得以分离,而分子比较大的最先洗脱出来。分子小的最后洗脱出来。分子小的最后洗脱出来。

柱色谱法的应用

HP-SCX强阳离子交换色谱柱的详细资料:

HP-SCX色谱柱,美国SEPAX生产的强阳离子交换柱,在2010新药典中,HP-SCX主要应用于分析 度米芬、盐酸二甲双胍、艾塞那肽原料药、富马酸、中药槟榔、焦槟榔等药品. 同时HP-SCX还应用于国标HPLC法中分析三聚氰胺.

色谱的柱效

柱温越高,压力越低,柱效也越高。但有一个极限,太高了对色谱柱不好

柱效指的是色谱的分离效果,其不仅与柱长有一定的关系,主要与色谱柱的填充物有关

因为色谱系统是一个流路系统,你关闭泵后仅仅是关闭了动力输入,但是废液还是在不停的向柱后排出,直至色谱柱前端压力降至0为止。所以不管你压力是否降到0,色谱柱仍然在向后排液来降低压力,不会有压力一直保存在柱内的情况。

柱色谱的作用原理

氧化铝填料的分离原理是物理吸附,即:氧化铝对不同极性物质的吸附能力不同,从而达到分离效果

氧化铝本身显一定的碱性,能抑制碱性物质的电离,保持其游离状态,故对碱性物质较好的分离效果; 若分离酸性物质,则与之成盐,会产生拖尾,难以分离

大孔树脂主要起分子筛的作用,适用于分离糖类大分子物质

固相萃取适用于液相色谱之前的样品预处理,使样品更干净

中性氧化铝适用于醛 醌 酮 某些苷 及酸碱溶液中不稳定的化合物如酯 等化合物的分离

柱色谱中常用的吸附剂有:

⑴氧化铝: 市售的层析用氧化铝有碱性、中性和酸性三种类型,粒度规格大多为100~150目。

碱性氧化铝 (pH 9-10)适用于碱性物质 (如胺、生物碱)和对酸敏感的样品(如缩醛、糖苷等),也适用于烃类、甾体化合物等中性物质的分离。但这种吸附剂能引起被吸附的醛、酮的缩合。酯和内酯的水解、醇羟基的脱水、乙酰糖的去乙酰化、维生素A和K等的破坏等不良副反应。所以,这些化合物不宜用碱性氧化铝分离。

酸性氧化铝 (pH 3.5-4.5)适用于酸性物质如有机酸、氨基酸等的分离。

中性氧化铝 (pH 7-7.5)适用于醛、酮、醌、苷和硝基化合物以及在碱性介质中不稳定的物质如酯、内酯等的分离,也可以用来分离弱的有机酸和碱等。

⑵硅胶: 硅胶是硅酸的部分脱水后的产物,其成分是SiO2·xH2O,又叫缩水硅酸。柱色谱用硅胶一般不含粘合剂。

⑶聚酰胺: 聚酰胺是聚己内酰胺的简称,商业上叫做锦纶、尼龙-6或卡普纶。色谱用聚酰胺是一种白色多孔性非晶形粉末,它是用锦纶丝溶于浓盐酸中制成的(制法详见附录十)。不溶于水和一般有机溶剂,易溶于浓无机酸、酚、甲酸及热的乙酸、甲酰胺和二甲基甲酰胺中。聚酰胺分子表面的酰氨基和末端胺基可以和酚类、酸类、醌类、硝基化合物等形成强度不等的氢键,因此可以分离上述化合物,也可以分离含羟基、氨基、亚氨基的化合物及腈和醛等类化合物。

⑷硅酸镁: 中性硅酸镁的吸附特性介于氧化铝和硅胶之间,主要用于分离甾体化合物和某些糖类衍生物。

液相色谱柱的作用

与经典液相柱色谱装置比较,具有高效、快速、灵敏等特点。对高沸点、难气化合物的混合物通过色谱柱核淋洗剂并以实现分离。应用于生物化学、生物医学、环境化学、石油化工等部门。

色谱柱的应用

高效液相色谱仪和气相色谱仪原理差不多,都是用载体把样品带到色谱柱中分离的过程,各自有各自优缺点和应用领域,不好放在一起比较,如果非要比较,也只能从以下四个方面来分析以下。

一、流动相

  气相色谱仪用气体作流动相,又叫载气。常用的载气有氦气、氮气和氢气。与个高效液相色谱仪相比,气相色谱仪流动相的种类少,可选择范围小,载气的主要作用是将样品带入气相色谱仪系统进行分离,其本身对分离结果的影响很有限。

  而在高效液相色谱仪中,流动相种类多,且对分离结果的贡献很大。换一个角度看,气相色谱仪的操作参数优化相对高效液相色谱仪要简单一些。此外,气相色谱仪载气的成本要低于高效液相色谱仪流动相的成本。

二、固定相

  因为气相色谱仪的载气种类相对少,故其分离选择性主要通过不同的固定相来改变,尤其在填充柱气相色谱仪中,固定相常由载体和涂敷在其表面的固定液组成,这对分离有决定性的影响,所以,导致了种类繁多的气相色谱仪固定相的开发研究。迄今已有数百种气相色谱仪固定相可供我们选择使用,但常用的高效液相色谱仪固定相也就十几种。

  故液相在很大程度上要靠选用不同的流动相来改变分离选择性。当然,毛细管气相色谱仪常用的固定相也不过十几种。在实际分析中,气相色谱仪一般是选用一种载气,然后通过改变色谱柱以及操作参数来优化分离,而高效液相色谱仪则往往是选定色谱柱后,通过改变流动相的种类和组成以及操作参数来优化分离。

三、分析对象

  气相色谱仪所能直接分离的样品是可挥发、且热稳定的,沸点一般不超过500℃。据有关资料统计,在目前已知的化合物中,有20%~25%可用气相色谱仪直接分析,其余原则上均可用高效液相色谱仪分析。也就是说气相色谱仪的分析对象远没有高效液相色谱仪多。

  需要指出的是,有些虽然不能用气相色谱仪直接分析的样品,通过特殊的进样技术,如顶空进样和裂解进样,也可用气相色谱仪间接分析。比如高分子材料的裂解色谱就是如此。这在一定程度上扩大了气相色谱仪分析对象的范围。此外,气相色谱仪比高效液相色谱仪更适合于气体的分析。

四、检测技术

  气相色谱仪常用的检测技术有多种,比如热导检测器、火焰离子化检测器、电子俘获检测器、氮磷检测器等,其中FID对大部分有机化合物均有响应,且灵敏度相当高,最小检测限可达纳克级。

      而在高效液相色谱仪中尚无通用性这么好的高灵敏度检测器。高效液相色谱仪仪器常配的也就是紫外-可见光吸收检测器和示差折光检测器。前者的通用性远不及气相色谱仪中的FID,后者的灵敏度又较低,且不适于梯度洗脱。

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