反转录步骤及其作用(什么叫做反转录)
什么叫做反转录
反转录是以RNA为模板,通过反转录酶,合成DNA的过程,是DNA生物合成的一种特殊方式。
反转录是进行基因工程过程中,以RNA为模板提取出DNA遗传信息的过程。
反转录过程由反转录酶催化,该酶也称依赖RNA的DNA聚合酶,即以RNA为模板催化DNA链的合成。
合成的DNA链称为与RNA互补DNA。
反转录酶存在于一些RNA病毒中,可能与病毒的恶性转化有关。
人类免疫缺陷病毒也是一种RNA病毒,含有反转录酶。
在小鼠及人的正常细胞和胚胎细胞中也有反转录酶,推测可能与细胞分化和胚胎发育有关。
大多数反转录酶都具有多种酶活性,主要包括以下几种活性:
①DNA聚合酶活性;以RNA为模板,催化dNTP聚合成DNA的过程。
②RNase H活性;由反转录酶催化合成的cDNA与模板RNA形成的杂交分子,将由RNase H从RNA5′端水解掉RNA分子。
③DNA指导的DNA聚合酶活性;以反转录合成的第一条DNA单链为模板,以dNTP为底物,再合成第二条DNA分子。
反转录酶的发现对于遗传工程技术起了很大的推动作用,目前它已成为一种重要的工具酶。
反转录的意义
主要是携带氨基酸进入核糖体,在mRNA指导下合成蛋白质。即以mRNA为模板,将其中具有密码意义的核苷酸顺序翻译成蛋白质中的氨基酸顺序(见蛋白质的生物合成、核糖体)。
在没有核糖体或其他核酸分子参与下,携带氨基酸转移至专一的受体分子,以合成细胞膜或细胞壁组分;作为反转录酶引物参与DNA合成;作为某些酶的抑制剂等。有的氨酰-tRNA还能调节氨基酸的生物合成。在许多植物病毒RNA分子中发现有类似于tRNA的三叶草结构,有的也能接受氨基酸,其功能不详。
逆转录反转录区别
到目前为止,没听过DNA逆转录,我们只学过RNA逆转录。Temin等人发现,某些引起肿瘤的RNA病毒以RNA为模板,反向地合成DNA(即反转录,也称逆转录),然后再以这段病毒为模板,互补地合成RNA,这是病毒复制的另一种方式。
希望能够对你有所帮助。
反转录42℃作用
可以,只要能够满足精确的温度控制就可以。根据所用逆转录酶的反应温度,选择37C,42C或者50C直接进行逆转录反应就可以了。所以PCR仪没有任何问题的。
反转录和逆转录是一个意思吗
转录和逆转录的区别
逆转录是以RNA为模板合成DNA的过程,即RNA指导下的DNA合成。是某些病毒的复制形式,需逆转录酶的催化。艾滋病病毒(HIV)就是一种典型的逆转录病毒。
逆转录过程由逆转录酶催化,此酶也称依赖RNA的DNA聚合酶(RDDP),即以RNA为模板催化DNA链的合成。合成的DNA链称为与RNA互补DNA。逆转录酶存在于一些病毒中,可能与病毒的恶性转化有关。人类免疫缺陷病毒(HIV)也是一种RNA病毒,含有逆转录酶。在小鼠及人的正常细胞和胚胎细胞中也有逆转录酶,例如端粒酶就是一种逆转录酶,推测可能与细胞分化和胚胎发育有关。
反转录是以RNA为模板,通过反转录酶,合成DNA的过程。是DNA生物合成的一种特殊方式。反转录是进行基因工程过程中,以RNA为模板提取出DNA遗传信息的过程。
反转录需要什么
RNA逆转录的产物是DNA,所以该过程需要的原料应该是4种游离的脱氧核苷酸(胞嘧啶脱氧核苷酸、鸟嘌呤脱氧核苷酸、胸腺嘧啶脱氧核苷酸、腺嘌呤脱氧核苷酸)。除非题目中有其他提示,否则你给出的答案肯定有误。
反转录和转录的区别
原核,DNA在拟核复制。叶绿体中,线粒体中也有DNA复制和mRNA转录
反转录的原理
PCR全称多聚酶链式反应,原理是DNA的体外扩增。具体来说:在EP管里加入DNA、合成原料(dNTP、引物)、耐热的DNA聚合酶(taq)后,放入PCR仪,PCR仪会利用升温使DNA变性,在聚合酶的作用下使单链复制成双链,进而达到基因复制的目的。用途:
1、核酸的基础研究:基因组克隆2、不对称PCR制备单链DNA用于DNA测序3、反向PCR测定未知DNA区域4、反转录PCR(RT-PCR)用于检测细胞中基因表达水平、RNA病毒量以及直接克隆特定基因的cDNA5、荧光定量PCR用于对PCR产物实时监控6、cDNA末端快速扩增技术7、检测基因的表达8、医学应用:检测细菌、病毒类疾病;诊断遗传疾病;诊断肿瘤;应用于法医物证学
什么是反转录
最简单的方法,从屏幕顶部往下拉,选择“屏幕录制”就可以录屏了。大多数人都用过
何为反转录作用
逆转录是以RNA为模板合成DNA的过程,即RNA指导下的DNA合成。
生物学意义:
1、对分子生物学的中心法则进行了修正和补充。
2、在实际工作中有助于基因工程的实施。
什么叫做反转录病毒
逆转录酶(reversetranscriptase) 又称RNA指导的DNA聚合酶。是以RNA为模板合成DNA的酶。这种酶是1970年美国科学家特明(H.M.Temin)和巴尔的摩(D.Baltimore)分别于动物致癌RNA病毒中发现的,他们并因此获得1975年度诺贝尔生理学或医学奖。
当RNA致癌病毒,如鸟类劳氏肉瘤病毒(Rous sar-coma virus)进入宿主细胞后,其逆转录酶先催化合成与病毒RNA互补的DNA单链,继而复制出双螺旋DNA,并经另一种病毒酶的作用整合到宿主的染色体DNA中,此整合的DNA可能潜伏(不表达)数代,待遇适合的条件时被激活,利用宿主的酶系统转录成相应的RNA,其中一部分作为病毒的遗传物质,另一部分则作为mRNA翻译成病毒特有的蛋白质。
最后,RNA和蛋白质被组装成新的病毒粒子。在一定的条件下,整合的DNA也可使细胞转化成癌细胞。 含有逆转录酶的病毒叫做反转录病毒,逆转录酶催化的反应叫反转录(reve-rsetranscrip-tion)。
在这个过程中,遗传信息流动的方向是从RNA到DNA,正好与转录过程相反,故称反转录。病毒逆转录酶含Zn2+,以脱氧核苷三磷酸为底物,从5’到3’合成DNA,反应需要引物。这个酶在许多方面与DNA聚合酶相似。
目前已发现不少动物反转录病毒,近年来也发现了几种人类反转录病毒。
艾滋病毒也是一种反转录病毒。
有的逆转录酶已提纯,可作为合成某些特定RNA的互补DNA的工具酶,也可用于DNA的序列分析和克隆重组DNA。