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的作用链霉亲和素(链霉亲和素结构)

更新:2022-10-20 02:39编辑:bebe归类:四季养生人气:79

链霉亲和素结构

亲和蛋白素是一种糖蛋白,可由蛋清中提取。分子量60kD,每个分子由4个亚基组成,可以和4个生物素分子亲密结合。现在使用更多的是从链霉菌中提取的链霉和素。生物素又称维生素H,分子量244.31,存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物,生物素-羟基琥珀亚胺酯可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小分子形成生物素化的产物。

链霉亲合素

链霉菌属于细菌界、链霉菌属,是一类革兰氏阳性细菌。虽然链霉菌在形态上分为菌丝和孢子,在培养特征上与真菌相似,主要通过孢子繁殖。但链霉菌没有真正的细胞核和坚固的细胞壁,大小与细菌直径基本相同,最适合生长PH范围与细菌基本相同,一般呈微碱性。另外,链霉菌对抗生素敏感,对抗真菌药物不敏感。繁殖方式为无性繁殖,遗传特性与细菌相似。

链霉亲和素和链霉素区别

嫁接法:此法是目前应用较普遍的嫁接法。这种方法.操作方便,成活率高,愈合速度快。其嫁接操作程序是:当接穗苗龄l0—12天、胚轴6—7厘米、砧木苗龄8—10天、胚抽长5—6厘米时,即可起苗嫁接。这时的幼苗,生活力强,嫁接后愈合快,成活率高.是最佳嫁接期。起苗前l天,应先浇1次水,使土壤疏松,以减少根系的损伤。起苗时,于轻轻从育苗土的底层抄起,每次l0一20株。在起苗时.应注意尽量照顾砧木与接穗苗的高度大体一致。如果砧木过高,可以适当降低切削位置,以保证根部平齐。

砧木苗的切削:将起出的苗、先去掉生长点。如果同时切去1片子叶,此法称之为单子叶靠接法;留2片子叶称之为双子叶靠接法。结合口的位置离子叶基1厘米左右最合适。下刀时,从上往下约45。角切入胚轴的1/3稍多一点,切结合口时,应一刀下去切到适宜处,刀口不宜来回移动.否则会破坏茎秆的输导组织而影响伤口愈合,降低成活率。

接穗的切削与嫁接:黄瓜苗比南瓜苗的胚轴细而软,切削时要准、狠,不能回刀或错刀。其切削部位根据南瓜苗的高低在下胚轴离子叶基约1厘米处下刀,由下向上呈30。角切削一刀.切入胚轴粗的l/2。

当砧木、接穗都切削好之后,随即将二者接合在一起。接合的方法是:一手拿南瓜苗,用大拇指或食指将结合口稍分开,把黄瓜苗的上切位插入南瓜苗的下切位,使之吻合。在嫁接时,不得来回移动,一次插牢,否则.易造成错位而影响成活率。接合好后,用嫁接夹将其夹住即可。为了不影响幼苗体内营养物质的输导与交换,嫁接夹的松紧度应据胚铀的粗细进行适当调整,嫁接夹的下沿应与接合口的下位取平,以利愈合后的黄瓜苗根茎的切割。

(2)插接法:把南瓜子直播到营养钵中,黄瓜子播在苗盘中,因要求接穗苗小于砧木苗,所以二者可同时播种。待南瓜苗吐心时、把南瓜苗的心叶挖掉,将竹签的一端削尖成1厘米的半圆锥形,其尖端0.5厘米处粗度同黄瓜苗胚轴粗度相近。然后用竹签在南瓜苗生长点处往下垂直扎孔,深0.5厘米。在黄瓜苗子叶下1厘米处,以30。角斜切,切口长0.5厘米,再从另一面下刀,把下胚轴切成楔形,然后拔出竹签,插入接穗。

(3)劈接法:用刀片在接穗子叶下l厘米处,切成“楔形”,楔长1厘米。把砧木生长点挖掉,用刀片自—下而上沿下胚轴中间,向下纵切1.2—1.3厘米的嫁接口,然后把接穗插入、并用嫁接夹固定。

(4)腹接法:接穗同插接法—样削成“楔形”。砧木同靠接法一样,在子叶下1厘米处,斜30。角下切l厘米接口。然后把接穗插入砧木的接口中,并用夹子固定。

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12 2018-11-14

如何嫁接树苗

(1)靠接法:此法是目前应用较普遍的嫁接法。这种方法.操作方便,成活率高,愈合速度快。其嫁接操作程序是:当接穗苗龄l0—12天、胚轴6—7厘米、砧木苗龄8—10天、胚抽长5—6厘米时,即可起苗嫁接。这时的幼苗,生活力强,嫁接后愈合快,成活率高.是最佳嫁接期。起苗前l天,应先浇1次水,使土壤疏松,以减少根系的损伤。起苗时,于轻轻从育苗土的底层抄起,每次l0一20株。在起苗时.应注意尽量照顾砧木与接穗苗的高度大体一致。如果砧木过高,可以适当降低切削位置,以保证根部平齐。   砧木苗的切削:将起出的苗、先去掉生长点。如果同时切去1片子叶,此法称之为单子叶靠接法;留2片子叶称之为双子叶靠接法。结合口的位置离子叶基1厘米左右最合适。下刀时,从上往下约45。角切入胚轴的1/3稍多一点,切结合口时,应一刀下去切到适宜处,刀口不宜来回移动.否则会破坏茎秆的输导组织而影响伤口愈合,降低成活率。   接穗的切削与嫁接:黄瓜苗比南瓜苗的胚轴细而软,切削时要准、狠,不能回刀或错刀。其切削部位根据南瓜苗的高低在下胚轴离子叶基约1厘米处下刀,由下向上呈30。角切削一刀.切入胚轴粗的l/2。   当砧木、接穗都切削好之后,随即将二者接合在一起。接合的方法是:一手拿南瓜苗,用大拇指或食指将结合口稍分开,把黄瓜苗的上切位插入南瓜苗的下切位,使之吻合。在嫁接时,不得来回移动,一次插牢,否则.易造成错位而影响成活率。接合好后,用嫁接夹将其夹住即可。为了不影响幼苗体内营养物质的输导与交换,嫁接夹的松紧度应据胚铀的粗细进行适当调整,嫁接夹的下沿应与接合口的下位取平,以利愈合后的黄瓜苗根茎的切割。   (2)插接法:把南瓜子直播到营养钵中,黄瓜子播在苗盘中,因要求接穗苗小于砧木苗,所以二者可同时播种。待南瓜苗吐心时、把南瓜苗的心叶挖掉,将竹签的一端削尖成1厘米的半圆锥形,其尖端0.5厘米处粗度同黄瓜苗胚轴粗度相近。然后用竹签在南瓜苗生长点处往下垂直扎孔,深0.5厘米。在黄瓜苗子叶下1厘米处,以30。角斜切,切口长0.5厘米,再从另一面下刀,把下胚轴切成楔形,然后拔出竹签,插入接穗。   (3)劈接法:用刀片在接穗子叶下l厘米处,切成“楔形”,楔长1厘米。把砧木生长点挖掉,用刀片自—下而上沿下胚轴中间,向下纵切1.2—1.3厘米的嫁接口,然后把接穗插入、并用嫁接夹固定。   (4)腹接法:接穗同插接法—样削成“楔形”。砧木同靠接法一样,在子叶下1厘米处,斜30。角下切l厘米接口。然后把接穗插入砧木的接口中,并用夹子固定。

1 浏览1258 2016-03-27

如何管理嫁接苗?

(1)芽接苗的管理检查成活、解绑和补接。大多数果树嫁接10~15天后即可检查成活。在检查的同时,发现绑缚过紧的要及时松绑或解除,以免影响加粗生长和绑缚物嵌入皮层,使芽片受损伤。加粗慢的树种,3周后也应解除绑缚物。未成活的应及时补接,过迟则砧木不能离皮,影响成活。 防寒:嫁接成活而接芽未萌发的苗叫半成苗(或芽苗)。冬季严寒、干旱的地区,为防止接芽受冻,应为半成苗灌足防冻水,或埋土防寒。埋土深度以超过接芽6~10厘米为宜,春季解冻后及时扒掉。 剪砧:半成苗在翌春萌芽前及时剪砧,促进接芽萌发。剪砧的部位在接芽上方0.3~0.5厘米处,剪口要平滑,并稍向接芽对面倾斜,不要留的太长,也不要向接芽一方倾斜,以免影响接口愈合。越冬后未成活的,春季可用劈接法补接。 除萌:剪砧后,砧木会发生很多萌蘖,要及时除去以免消耗水分和养分,影响接芽生长。 立支柱:在风大的地区要对芽接苗立支柱。一般新梢长到5~8厘米时,紧贴砧木立一小棍,将新梢绑在棍上,立支柱可使苗木生长直立,并防止被风吹断。剪砧时剪下的枝条可以插在苗旁作支柱用。 圃内整形:为加速幼树成形,可在圃内进行整形。一些树种如柑橘类、桃的大多数品种当年可萌发多次副梢。苹果中的金冠、红玉等,梨中的巴梨、日面红等均有较强的副梢萌发力。利用这种副梢萌发特性可以进行圃内整形。准备用于整形的苗木株行距要加大,株行距不小于60~70厘米×25~30厘米。采用的手段有摘心和涂抹发枝素等。 摘心时期依定干高度及当地气候条件而异,应避免过晚,过晚不能形成充实的副梢。如在渤海湾地区,苹果苗木一般应在6月下旬以前摘完,对未达摘心标准的苗木不可勉强摘心。摘心部位在节间已充分伸长而尚未木质化处,摘去嫩梢10厘米左右。对整形带以下萌发的新梢及时抹去。只在整形带内选留一定数量的副梢作为主枝和中央领导干。 涂抹发枝素,可促进苹果新梢侧芽萌发,萌发率可达80%。发枝素是一种化学整形药剂,可以促进新梢侧芽萌发并使形成的副梢角度加大。华北地区以5月中下旬至6月中下旬效果为好。将绿豆粒大小的发枝素软膏涂抹到饱满芽体上即可。经试验证明,发枝素在多数苹果品种上均有明显效果。(2)枝接苗管理枝接后,砧木上也容易萌发萌蘖,要及早抹去。如果枝接接穗多,成活后应选留方位好、生长健壮的保留一枝,其余分次剪除。留下的接穗如有好几个萌条,应选上部的使之延长生长,其余的根据方向和空间大小决定去留。春季风害严重的地区要支柱保护。其他有关管理参见芽接苗的管理。 嫁接苗的肥水管理和病虫害防治同实生苗。

浏览20 2019-01-31

怎样进行嫁接苗管理?

专家解答 (1)嫁接后1~3天的管理此期是愈伤组织形成时期,也是嫁接苗成活的关键时期。一定要保证小拱棚内湿度达95%以上,棚膜内壁应挂满大量露珠,从外面看不见嫁接苗。可依室内湿度大小,每天对嫁接苗喷雾1~2次,其中1次喷500倍液的百菌清,以预防病菌侵染。喷雾时以喷头朝上,雾点自然下落为佳。由于温床内高温、多湿易发生病害,所以需每天进行2次换气,换气后再次喷雾。温度白天保持25~27℃,夜间16~20℃,地温20℃左右。冬季黄瓜嫁接育苗,关键问题是小拱棚内地温、气温偏低,为保证小拱棚内的较高温度,必须在苗床下增设电热线。嫁接前2天,小拱棚应覆盖纸被进行全天遮光,第3天可在早晚适当揭开纸被见弱光。 (2)嫁接后4~6天的管理嫁接后4~6天正是假导管形成期。此时棚内的湿度应降低至90%左右,为此小棚顶缝应开3~6厘米小缝,每天通风1小时左右。小棚内白天温度保持在25℃左右,夜间15~18℃,温度超过30℃时应继续用纸被遮阴降温。光照逐渐加强,只在中午强光时适当遮阴。如管理正常,接穗的下胚轴会明显伸长,子叶叶色由暗深绿色转成淡绿色,第一片真叶开始吐心。 (3)嫁接后7~10天的管理此期是真导管形成期。棚内湿度应降至85%左右,湿度过大,不仅砧木子叶容易感染,而且接穗容易长出许多不定根影响成活,或造成接穗徒长。因此,小棚要整天开3~10厘米的缝,进行通风降温,一般不再盖纸被。正常条件下,接穗可长出1~2厘米有光泽淡绿色真叶,此标志接穗已与砧木完全愈合,应及时将已成活的嫁接苗移出小拱棚。凡真叶不足1厘米或真叶长到1厘米以上但叶色暗绿的,应在小棚内多放几天,达到上述标准时,再移出小棚,不可操之过急。 (4)嫁接后10~15天的管理移出小棚后的嫁接苗,经2~3天的适应期,接穗第一片真叶已长到3厘米左右时,同自根苗一样进行大温差管理,以促进嫁接苗花芽分化,育成健壮的嫁接苗。 提示板 靠接后12~13天,在嫁接夹下方,将黄瓜下胚轴用手指捏伤,破坏输导组织,间隔3~4天,再从接口下方把黄瓜下胚轴割断。嫁接苗成活期间,砧木会随时发生萌蘖,如发现后要及时去除,否则会严重影响黄瓜幼苗的正常生长。

1 浏览20 2019-02-25

怎样培育嫁接苗?

(1)嫁接前的准备①GB9659国家标准对接穗的要求a.接穗须从母本园或采穗母树上采集,采穗母树应经县级以上果树主管及植检部门鉴定,确认为品种纯正的优质高产树,且无检疫病虫害。 b.从外地引进接穗,除严格要求品种纯正外,还必须经植物检疫部门检验,取得“植物检疫证书”后方能引入。 c.采接穗应在树冠外围中上部选取充分成熟、健壮的一年生营养枝,每枝接穗应具备3个以上有效饱满芽。 ②接穗的采集和贮藏处理。接穗应按GB9659国家标准要求进行采集。采穗时应选择无风晴天的上午露水干后或下午阳光较弱时进行。采下后应立即剪去叶片,每50~100条扎成1捆,用湿布包好。 采集的接穗最好马上嫁接,如果不能及时接完要贮藏起来。贮藏接穗的方法有两种。一是河沙层积法,即在室内选干净的地面,用干净的细河沙与接穗分层埋藏。沙的湿度以手插入沙中抽出后手上粘有沙粒而指甲无沙为宜,如指甲上有沙表示太湿,手上无沙表示太干。底层和面层的沙厚约3厘米,中间几层放接穗后沙盖到看不见接穗便可,最后加盖薄膜保湿。以后每7天检查1次,挑除腐烂接穗,调节沙的湿度。一般可贮藏50~60天。另一种是湿草纸包装法。接穗量少或需要远运时,先把优质草纸浸湿后尽量捏干,把接穗摊在4层厚的湿纸上卷起来,外面再包以蜡纸或塑料薄膜,定期打开检查除坏,可贮1~2个月。少量接穗用塑料薄膜包好,放进冰箱保存。如果育苗地与采穗距离不远,最好是随采穗随嫁接,能更好提高成活率。 夏季嫁接的,时值高温季节,接穗不耐久藏,应即采即接,最好不超过7天,否则成活率低。 嫁接时应进行接穗消毒处理,一般用1000单位/毫升的盐酸四环素液(每千克水配25万单位的盐酸四环素针剂4支)浸2小时,然后取出即用清水冲洗干净。从溃疡病区剪取的接穗最好用700单位/毫升的硫酸链霉素和1%乙醇的混合液浸30分钟,取出静置20~30分钟,清水冲洗摊开晾干表面水分,用清洁草纸包装保湿贮藏或嫁接。 ③剪砧。冬季嫁接,接前3~6天把砧木在离地面10厘米处剪去砧顶,以降低砧木水分,促进愈合。剪后做好清园工作。夏接分2次剪砧,接后5~7天半断干倒砧,成活后全断干。秋接可不断干,或剪去1/3,待成活后才从接口上方0.5厘米处断干。适当高位嫁接可避免流胶病发生,尤其是大棚营养筒密集型育苗。 ④准备好用具和包扎物。嫁接前要准备好用具和包扎物,包括嫁接刀、盛芽盆、磨刀石以及切好塑料薄膜带(宽0.6~1厘米,长20~25厘米)等。(2)嫁接时期。 嫁接以接穗枝条充分成熟又无萌芽时为好,一年四季都可进行。但以立春前最为适宜。冬天暖、枝条充实早可提早嫁接,反之则延迟。为了快速育苗可采取夏接和秋接。嫁接天气春季应选晴暖天进行。下雨天雨后土太湿或强北风的寒冷天气不宜嫁接,以免降低接活率。如夏秋嫁接应避免在风雨天及中午阳光强烈时进行。(3)嫁接方法。 嫁接方法有多种,有芽片腹接、单芽切接、芽接等。广东采用单芽腹接法较多。近年有采用单芽腹接法。因单芽腹接法可省去切接涂蜡工序,又不受时间限制,还可用于较小的砧木。现把单芽腹接法介绍如下。 ①削接穗。单芽削法:左手拿接穗,右手拿刀,接穗基部向外,平整一面向下,菱形一面向上,在芽下约1厘米处向前斜削成45°角的削面,再将接穗平整一面翻转向上,从芽点附近起向前削去皮层(从芽点上方削起的为通头芽)。要求削面平滑,恰到形成层(呈黄白处)。最后将穗侧转,芽点向上,在芽点上方约0.5厘米处刀口斜面为60°角将其削断,放入盛有清水的盆中备用。这种不通头的接芽叫普通单芽。 长片小芽的削法:芽眼向上,在芽下方约1厘米处以45°角斜削一刀,然后在芽眼上方约0.5厘米处落刀向前平削,将芽稍带木质削下,放入盛有清水的盆中备用。 ②切削砧木。在离地8厘米左右的腹部或更高的位置选平直一面切削皮层,刀要沿皮部和木质部交界处向下纵切,长度视接穗长短而定,再将削下的砧皮切短1/3或1/2,以利包扎和芽的萌发。 ③放接穗。应选与砧木切面大小一致、长短适宜的接穗。如接穗小的可放在一侧,使一侧的形成层对正密接。接穗基部的砧木切口底部要紧贴,上面不要“架桥”。 ④扎塑料薄膜带。自下而上均匀作覆瓦状缚扎,仅露出芽眼以利发芽。如用普通单芽,则可先把薄膜带折成小条,中间先扎一圈,然后向下,再向上包扎,使接穗与砧木切口密接,容易成活。 为了减少剪第二次砧工作的麻烦,潮汕地区目前采用单芽切接法以塑料薄膜带包扎、接穗露出部分以及砧木的切口用接蜡涂封的办法很好。但夏秋接仍采用长片小芽腹接法。 ⑤鉴于病毒病、类似病毒病等病害可能存在,在嫁接时应实行嫁接工具随时消毒。一个品种嫁接完后再接另一个品种,以免交叉感染。(4)嫁接苗的管理①初期管理。接后15天左右检查成活情况,发现接芽变黄或变褐色,表明不能成活就即行补接。及时疏除砧木上的萌芽。接穗萌芽后如有两个芽以上的,应除去弱芽、歪芽,留一壮而直的芽。如见花蕾要摘除,遇天旱土壤太干应适当淋水,促进春梢萌发生长。 ②施肥。原则是春芽期不施或少施肥。待春芽充分成熟后,施腐熟液肥,促夏芽生长。做到:培养第一次夏梢,照顾第二次夏梢,猛攻秋梢,控制冬梢。 具体做法:嫁接前1个月应施1次重肥,以供春芽健壮生长。在春芽停止生长前不施肥。如苗生长差,可以施1次腐熟的薄肥,但不要伤嫩芽。春芽基本停止生长时施1次薄肥,至谷雨前再施1次重肥,促进第一次夏芽健壮达到剪顶高度,这是培育健壮苗木的一个重要环节。一般苗木整形是第二次夏芽要完全剪除,因此第一次夏芽基本停止生长后保持苗木不缺肥便可。秋芽是构成苗木的分枝,培养秋芽是苗木的整形关键,故剪顶前应施1次腐熟的麸水肥,最好剪前1个月施花生麸粉每667米250~60千克。秋芽萌发后施1~2次薄肥,促进秋芽强壮。如果苗木冬季不出圃,则注意控制水肥,防止晚秋芽和冬芽萌发。并于翌年春芽萌发前施1次重肥,以提高苗木质量。春芽萌发后可酌施1次薄肥。 ③解除包扎物。一般接穗抽出的第一次芽老熟后解除,过迟影响苗木生长。同时还要剪去接穗以上过长的砧木,剪时在贴桩齐接口处斜剪,不能挤伤接穗及压伤砧木接口周围皮部,切忌过高或过低。 ④整形。为了保证嫁接苗按要求生长,必须进行整形,包括疏芽、摘心、剪顶等。 疏芽、摘心。第一、二次夏梢发生后,要注意疏芽,每次选留1条直而壮的夏梢,其他疏除。留下的第二次夏梢,要进行摘心,减少养分消耗,以充实第一次夏梢。 剪顶。一般在立秋前后进行剪顶。寒露风来得早的及容易干旱的地方或秋末冬初出圃的适当提前,才能保证秋梢充实。剪顶的方法是:在第一次夏梢中上部,选择节间疏密一致、叶片完整的部位,距地面25~30厘米高度剪断。如春梢超过这个高度,则在春梢上剪除。 ⑤苗木剪顶后的管理。苗木剪顶后应立即进行苗圃清洁,清除杂草和落叶,并喷射0.5~0.6波美度的石硫合剂或混合洗衣粉400~500倍液,或喷松脂合剂15~20倍液1~2次,以减少秋梢病虫害。 及时摘除早吐的零星萌芽,待绝大部分苗木有3~5个芽萌发后才放梢,保持分枝生长均衡,也有利于病虫防治。待芽生长至3厘米左右时,选留健壮、均匀分布于各个方位的主枝3~4条,其余的及时疏除。 整个秋梢生长期,要保证肥水供应充足,使新梢生长健壮,并要特别注意做好潜叶蛾、红蜘蛛、溃疡病的防治工作,保证秋梢生长正常,叶片完整,不受为害。(5)苗木出圃①优良苗木的标准。优良苗木的质量标准是无黄龙病及其他检疫性病害如溃疡病等,苗木健壮,接合部位愈合良好,要求符合GB/T9659的有关规定。苗高50厘米以上,主干高20~30厘米,茎粗0.8厘米以上并有分布均匀、颜色鲜黄的须根,整株的地上部与地下部生长均衡等。各柑橘主要产区嫁接苗出圃标准按国家标准GB/T9659规定执行(见表24)。 表24 柑橘嫁接苗分级标准注

浏览23 2019-01-31

怎样管理嫁接苗?

(1)芽接苗的管理秋季芽接后10~15天即可检查是否成活,一般接芽新鲜,叶柄一触即落即已成活。接后25天即可解除绑缚,对未成活的要及时补接。带木质部芽接的可于翌年初春解除绑缚。嫁接苗通常在第二年春天萌芽前剪砧,以促进接芽生长。剪口距接芽0.5厘米左右,并向接芽对面稍有倾斜,以利愈合。剪砧后应及时除去萌蘖,以免影响苗木生长。夏季嫁接的当年出圃苗应在接后2周解绑,一般需2次剪砧。第一次在解绑后从接芽上一节剪砧,保留叶片,并除去腋芽;第二次在接芽萌发后,在芽上方0.5厘米处剪砧,并及时除去接芽下发生的分枝,使砧苗向上顺直。8月中下旬为促进组织充实要进行摘心,对未停止生长的二次枝和主梢要全部摘心。(2)枝接苗的管理接穗发芽后,选留一个方位正,生长健壮的新梢,将其余萌芽抹除,以利苗木生长。其他管理与芽接苗相同。 无论芽接苗还是枝接苗都要加强土、肥、水管理和病虫害防治。

链霉亲和素的大小

竞争法一般分为直接竞争法和间接竞争法,这里我们以直接竞争法为例进行原理讲解。

直接竞争法,其基本原理是:将合适浓度的包被抗体包被于微孔板中,加入无关蛋白载体封闭未结合位点,加入标准品(样本)和生物素标记的抗原物质进行竞争结合,经合适的温度和一定时间的孵育,洗涤后,加入HRP标记的链霉亲和素进行反应,TMB显色,微孔板中颜色的深浅与待测物的浓度呈负相关。

链霉亲和素结构式

DAB染色液用于免疫组化染色,应用在Dako 自动染色系统上。

DAB染色液的使用方法

1.DAB显色液配制

10mM Tris-HCl (pH7.6) 9mL +DAB (diaminobezidin 3,3-二氨基联苯胺) +0.3%(W/V) NiCl2 或CoCl2 1mL ,显色时加入5-10mL 30%H2O2 混匀后立即使用

2. 显色

准备好含有待测蛋白的固相膜:包括电泳、转印、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤。

3.加入适量的DAB显色液,铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。

4. 置于平式摇荡仪上,在室温下孵育2至5分 钟,避免光照(暗室操作),直至棕褐色沉淀出现。

5.用镊子夹起固相膜,放进无离子水里清洗。

6.空气中晾干。

7. 拍照记录 。

链霉亲和素是蛋白质吗

DAB染色液用于免疫组化染色,应用在Dako 自动染色系统上。

一、DAB染色液的使用方法

⒈DAB显色液配制

10mM Tris-HCl (pH7.6) 9mL +DAB (diaminobezidin 3,3-二氨基联苯胺) +0.3%(W/V) NiCl2 或CoCl2 1mL ,显色时加入5-10mL 30%H2O2 混匀后立即使用

⒉显色

准备好含有待测蛋白的固相膜:包括电泳、转印、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤。

⒊加入适量的DAB显色液,铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。

⒋置于平式摇荡仪上,在室温下孵育2至5分 钟,避免光照(暗室操作),直至棕褐色沉淀出现。

⒌用镊子夹起固相膜,放进无离子水里清洗。

⒍空气中晾干。

⒎拍照记录 。

二、DAB染色液的注意事项

⒈DAB溶液应低温密封保存。如有结晶析出,应确保结晶完全溶解再行使用;

⒉显色工作液应现用现配,新鲜配制的工作液应为无色或浅棕色,如颜色过深,请勿使用;

⒊DAB在常温下不稳定,每次取用后均应及时加盖密封放回冰箱,以免因DAB分解影响实验,或因渗漏造成实验环境污染;

⒋DAB有潜在致突变作用,操作时应注意穿戴好防护用具。

链霉亲和素作用

Au(SR)金原子簇(SR=SPh,SCHCH,SCH (CH)Ph,SCH)

西安瑞禧生物科技有限公司经营的产品种类包括有:合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等等。

链霉亲和素与生物素结合

链霉亲和素-生物素1:4间接包被,具备光信号放大作用;

采用模块组合式设计,2台免疫仪联机,与生化仪可联7台

链霉亲和素和生物素结合

SA为 略偏酸性的蛋白。SA的每条肽链含159个氨基酸残基,其中赖氨酸、精氨酸等碱性氨基酸的含量比一般亲合素少,反之含酸性氨基酸较多,其等点为6.0,较A(pI=10)为低,同时在结构中SA不含任何糖基,而A含糖可高达10%。

SA分子量为65000,由4条序列相同的肽链构成,每条SA肽链可以结合1个生物素分子。因此与A一样,每个SA分子也具有4个可与生物素分子结合位点,其结合常数与A相同为1015mol/L。约为抗原抗体间ka(105~1011 mol/L)的1万倍以上。

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