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dna提取试剂的作用是什么(dna提取试剂的作用是什么意思)

更新:2023-04-28 13:31编辑:bebe归类:中医养生人气:0

dna提取试剂的作用是什么意思

植物DNA的提取

1、目的要求

学习从新鲜的叶片中提取植物总DNA的方法。

2、实验原理

本实验介绍的就是一种快速简便提取植物总DNA的方法:先将新鲜的叶片在液氨中研磨,以机械力破碎细胞壁,然后加入十六烷三甲基溴化铵(简称CBA,是一种阳离子去污剂)分离缓冲液,使细胞膜破裂,同时将核酸与植物多糖等杂质分开。再经氯仿-异戊醇提取去除蛋白,即可得到适合于酶切的DNA。

3、试剂和器材

一、试剂

CTBA抽提缓冲液:2%CTBA.100mmolL Tris-HCl,pH8.0;20mmolL EDTA;1.4molL

NaCl;0.2%(vv)巯基乙醇共100mL:称取2 g CTBA,8.18 g NaCI,0.74 g EDTA Na22H20,加入10mL1molL的Tris-HCl,pH8.0,0.2mL的巯基乙醇,加水定容至100mL.

TE:TrisEDTA缓冲液:10mmolL Tris-HCl,pH8.0;1mmolL EDTA。

异丙醇:乙醇:氯仿一异戊醇(24:1,V:V):液氮。

二、材料

新鲜植物叶片。

三、材

研钵:离心机:恒温水浴。

4、操作方法

1.称取lg新鲜叶片,置于预冷的研钵中,倒入液氮,将叶片研至粉末。

2.将叶片粉末转入一个30mL离心管中。

3。加10 mL CTBA抽提缓冲液,轻轻转动离心管使之混匀。于65℃温育10min。加入等体积的氯仿一异戊醇,轻轻颠倒混匀。

4.室温下4000rmin离心10min,回收上层水相。在回收的上层水相中。

5。加入23体积预冷的异丙醇(预冷至一20℃),轻轻混匀,置冰箱中放置数小时梦至过夜,使核酸沉淀下来。

6.室温下4000rmin离心10min。

7.小心倒去上清液,用80%乙醇洗涤沉淀物.尽量沥干乙醇,置于真空干燥器内干称重,计算产率。

8.将DNA沉淀溶于1mLTE中。

dna提取试剂有毒吗

核酸提取试剂中的洗脱液的作用是固液分离。收集清液。即为核酸。根据核酸试剂中心文件显示。核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物。为生命的最基本物质之一。洗脱液、吸附物和待提取样品混合并反应。得到吸附有核酸的所述吸附物。

dna提取液中各成分的作用是什么

DNA Wash Buffer 用无水乙醇加水配的 用来洗柱子的buffer HB 应该不是一个盒子的吧?buffer EB 用来洗脱DNA的.一般是TE溶液.Solution I 溶解菌体的.50mmo1/L 葡萄糖5mmo1/L 三羟甲基氨基甲烷(Tris)Tris•HCl(pH8.0)1.0 mmo1/L 乙二胺四乙酸(EDTA)(pH8.0)Solution II 裂解菌体的.0.4mo1/L Na0H,2%SDS(十二烷基硫酸钠),用前等体积混合Solution III 中和液5mo1/L 醋酸钾 60 mL冰乙酸 11.5mL

dna提取物

黎明觉醒基因系统需要基因药剂和基因序列。因为基因药剂是让玩家获得基因能力的药剂,而基因序列是表示基因能力的序列,两者缺一不可,才能使用黎明觉醒基因系统获得基因能力。此外,黎明觉醒基因系统还需要一定的游戏币作为消耗,玩家需要通过完成游戏任务或者购买游戏币来获取。

dna提取试剂盒有哪些

根据你扩增的产物情况选择合适分辨率的凝胶浓度,比如:如果你的条带离引物二聚体很远,且比较单一,那可用1%~1.5%的胶即可,可稍微制厚一点,方便点样;如果你的条带只有一两百即离引物二聚体很紧或者非目标条带很多,那你需要浓度稍大一点的胶(3%~5%),电泳时间长一点,这样可使你的目的条带与非目的条带分开,方便切胶.

胶制好后即可点样,一般会使用宽一点的梳子可使上样量加大,提高回收浓度.点完样后即可开始电泳,电泳结束后,在紫外光仪下条带可显示出来,用薄的锋利的刀片快速将目标条带切下,切胶时要注意:尽量把目标条带切下,尽量包含较少的琼脂糖胶,并切忌将非目的条带切下,还要注意尽量让紫外线照射时间短(因为紫外照射会发生核苷酸变异,产生TT二聚体).

目标条带切下后,可使用专门的琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒(很多公司都有),按照试剂盒的说明书即可回收其中的DNA.

祝顺利!

dna提取试剂注意事项

1.RNA在细胞内极易降解,样本选择时一定要选取新鲜的样本组织或者取样后迅速低温处理(液氮速冻);样本出现多次反复冻融后,RNA得率会严重下降,也会导致RNA降解;RNA提取环境要保持无RNA酶污染;   2.RNA容易受到环境污染导致RNA严重降解,建议实验过程中注意更换实验手套,使用所有耗材应该均无RNA酶的一次性耗材;   

3.试剂盒中BufferEB(RNA专用)中含有少量EDTA,可能影响下游实验,使用时适当稀释,如果用其他洗脱液洗脱,要确保PH>7.5,PH过低影响洗脱效率;   

4.离心柱漂洗完成后,尽可能烘干柱膜上残留乙醇,残留乙醇会影响洗脱效率和下游实验效果;柱膜也不建议过度干燥,没有乙醇味道残留最好,如果过度干燥可能影响RNA溶解;如果A260/230值过低,说明样本提取过程中漂洗不彻底,有盐离子残留,建议增加漂洗次数;   

5.对于RNA提取,A260/280<1.9说明有可能存在DNA污染或者蛋白污染,如果洗脱样本时没有使用BufferEB,而使用ddH20(确保无RNA酶),比值或偏低,因为Ph值会影响吸光值,并不表示样本纯度低。

dna提取液的作用

一般是三次离心。

第一次离心是在细胞破碎后,目的是除去溶液中的固体杂质。

第二次离心是在第一次离心的上清中加入苯酚/氯仿/异戊醇溶液以后,目的是将DNA和蛋白质等杂质分离。

第三次离心是在第二次离心的上清中加入氯仿/异戊醇溶液之后,目的是进一步纯化DNA、并除去上一步中引入的苯酚。

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