dna聚合酶作用过程(dna聚合酶作用原理)

dna聚合酶作用原理

DNA聚合酶作用主要是复制DNA，并且起到修复DNA的作用。

DNA聚合酶是人体重要的一种物质，能够与DNA合成起始于引物和DNA配对，配对的引物3'端带有一个自由的羟基，随后是在DNA聚合酶的催化下由这个自由羟基氧上的配对三磷酸碱基上的磷原子的亲核取代，在戊糖和磷酸之间形成脂键从而完成一个碱基的延伸。

dna聚合酶作用原理是什么

DNA扩增原理是一种利用聚合酶链反应（PCR）来高效地复制指定DNA片段的技术。它可以在几小时内将极少量的DNA分子放大成几百万份，从而为临床检测提供了可能。

dna聚合酶工作原理

DNA聚合酶作用主要是复制DNA，并且起到修复DNA的作用。DNA聚合酶是人体重要的一种物质，能够与DNA合成起始于引物和DNA配对，配对的引物3'端带有一个自由的羟基，随后是在DNA聚合酶的催化下由这个自由羟基氧上的配对三磷酸碱基上的磷原子的亲核取代，在戊糖和磷酸之间形成脂键从而完成一个碱基的延伸

dna聚合酶的具体作用

DNA聚合酶以脱氧核苷酸三磷酸（dATP、dCTP、dGTP、或dTTP，四者统称dNTPs）为作用对象，作用时期为DNA复制时期。

解旋酶以DNA双链的氢键为作用对象，作用时期为DNA或RNA复制时期。

RNA聚合酶以四种核糖核苷酸三磷酸（NTP：ATP、GTP、CTP、UTP）为作用对象，作用时期为转录时期。

dna聚合酶的

DNA聚合酶，又称DNA依赖的DNA聚合酶，它是以亲代DNA为模板，催化底物dNTP分子聚合形成子代DNA的一类酶。

这些DNA聚合酶的共同特征为：

①具有5’→3’聚合酶活性，这就决定了DNA只能沿着5’→3’方向合成；

②需要引物，DNA聚合酶不能催化DNA新链从头合成，只能催化dNTP加入核苷酸链的3'-OH末端。

因而复制之初需要一段DNA引物的3’一OH端为起点，合成5’→3’方向的新链。

dna聚合酶的作用机理

DNA聚合酶III在细胞中存在的数目不多，是促进DNA链延长的主要酶。纯化的DNApolⅠ由一条多肽链组成，约含1000个氨基酸残基，MW为109KD。分子含有一个二硫键和一个-SH基。通过二个酶分子上的-SH基与Hg2+结合产生二聚体，仍有活性。

每个酶分子中含有一个Zn2+，在DNA聚合反应起着很重要的作用。每个大肠杆菌细胞中含有约400个分子，每个分子每分钟在37℃下能催化667个核苷酸掺入正在生长的DNA链。经过枯草杆菌蛋白酶处理后，酶分子分裂成两个片段，大片段分子量为76KD，通常称为Klenow片段，小片段的分子量为34KD。

此酶的模板专一性和底物专一性均较差，它可以用人工合成的RNA作为模板，也可以用核苷酸为底物

dna聚合酶主要作用

DNA聚合酶作用部位是磷酸二酯键。

1、聚合作用：在引物RNA-OH末端，以dNTP为底物，按模板DNA上的指令，即A与T，C与G的配对原则，逐步逐个、连续地将dNTP加到延伸中的DNA分子3'-OH末端，逐步合成延长中的子链DNA。这是DNA聚合酶的主要作用；

2、3’→5’'外切酶活性（校对作用）：这种酶活性的主要功能是从3’→5’方向识别和切除不配对的DNA生长链末端的核苷酸，3’→5’外切酶活性的主要功能是校对作用。当加入的核苷酸与模板不互补而游离时则被3’→5’外切酶切除，以便重新在这个位置上聚合对应的核苷酸，可见，3’→5’外切酶活性对DNA复制真实性的维持是十分重要的。以保证复制过程的保真性和准确性；

3、5’→3’外切酶活性（切除修复作用）：该活性是从5’→3’方向水解DNA延长链前方的DNA链（即只对DNA上双链处的磷酸二酯键有切割作用），主要产生5'—脱氧核苷酸。这种酶活性在DNA损伤的修复中可能起着重要作用。