EDT对DNA有何作用(edta对dna的影响)
edta对dna的影响
主要成分是:NaCl,Tris-HCl(PH=8),EDTA(PH=8),SDS.NaCl,Tris-HCl主要是调节溶液的PH,维持一定的离子浓度.EDTA主要是二价金属离子的螯合剂,使影响DNA的DNA酶中的钙离子和镁离子和EDTA结合,使酶失去活性,有利于提取完整DNA;
SDS主要是和蛋白质结合,使其变形沉淀,从而利于DNA的提取,减少和清除带白质杂质!
edta与dna
为了不使dna降解,溶液中必须含有edta螯合剂以便螯合dna水解酶的辅酶,此外,dna在酸性条件下易降解,因此需要给予碱性环境。随意buffer都是含有edta的碱性溶液。至于为什么用溶液而不用干粉,是为了方便使用而已(免去了溶解过程,也避免了非专业溶解造成的dna水解)
一般说离子强度较低的介质中,DNA的熔解温度较低,熔解温度的范围较宽。而在较高的离子强度的介质中,情况则相反。
edta影响ph吗
H2EDTA + CU2+ ---CUEDTA + 2H+
正常情况下有要有缓冲溶液
保证PH稳定在一定范围内
但是EDTA过量太多的话
超出缓冲溶液的范围了
所以PH 就会显著减少
在用EDTA滴定金属离子的时候 必须加缓冲溶液,否则金属离子置换出EDTA的H+,H+太多的话H+效应过于严重,反应的条件稳定常数太小,计算结果会有相当大相当大的误差!!
edta会影响ph吗
edta标准溶液的配制是不需要控制PH值的,只需要将相应质量的edta二钠盐溶于水中即可。
edta标准溶液的标定有多种方法,如果是PH需要控制在10左右,则是采用碳酸钙做基准物,以铬黑T做指示剂,来进行edta的标定,滴定终点为溶液由亮紫色变为蓝色。
以铬黑T做指示剂,溶液的PH需要控制在10左右,此时铬黑T指示剂的颜色变化才能清楚的观察到,所以要加入PH值为10的缓冲溶液,一般为氨-氯化铵缓冲溶液。
edta在dna提取的作用
巯基乙醇是抗氧化剂,有效地防止酚氧化成醌,避免褐变,使酚容易去除基因组DNA。