半乳糖苷酶的作用(半乳糖苷酶高怎么回事)

更新：2023-03-23 10:39编辑：bebe归类：美容美体人气：0

半乳糖苷酶高怎么回事

LacZ阳性显色为深蓝色，其染色的部位为目的基因敲掉的部位，因此是报告基因的定位。

LacZ基因广泛用于基因表达调控研究中的一种基因。1969年，美国哈佛大学以Beckwith博士为首的研究小组，套用DNA分子杂交技术首次分离到该基因．LacZ基因编码的β一半乳糖苷酶（简称β-gal)是由4个亚基组成的四聚体，可催化乳糖的水解．

Beta-gal比较稳定，用X-Gal为底物进行染色时，呈蓝色，便于检测和观察．LacZ基因的诸多优点使它成为基因工程实验中的一个常用标记基因，比如常用于转化菌株筛选，β-半乳糖苷酶显色反应选择法，即，蓝白筛选．例如，基因克隆中常用的质粒载体PUC 19及噬菌体载体M13系列均带有LacZ基因．

1.添加诱导物：①酶的作用底物：如青霉素是青霉素酰化酶的诱导物。②酶的反应产物：如纤维素二糖可诱导纤维素酶的产生。③酶的底物类似物：如异丙基-β-硫代半乳糖苷（IPTG）对β-半乳糖苷酶的诱导效果比乳糖高几百倍

2.降低阻遏物浓度：微生物酶的生产受到代谢末端产物的阻遏和分解代谢物阻遏的调节。为避免分解代谢物的阻遏作用，可采用难于利用的碳源，如在β-半乳糖苷酶的生产中，只有在培养基中不含葡萄糖时，才能大量诱导产酶。

3.添加表面活性剂（产酶促进剂）：改变细胞的通透性或对酶分子有一定的稳定作用如在霉菌的发酵生产中添加1%的吐温可使纤维素酶的产量提高几倍到几十倍。

乳糖酶生产成本高，价格与效果是成正比的,所以乳糖酶贵是因为效果好。

乳糖酶又称 β-半乳糖苷酶，是人体中的一种消化酶，是以母乳/奶粉为主要营养来源的婴幼儿体内最重要的消化酶，乳糖酶的主要功能是消化乳糖，将乳糖水解成能够被人体吸收的半乳糖和葡萄糖。

乳糖操纵子的组成：大肠杆菌乳糖操纵子含Z、Y、A三个结构基因，分别编码半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰转移酶，此外还有一个操纵序列O，一个启动子P和一个调节基因I。

阻遏蛋白的负性调节：没有乳糖存在时，I基因编码的阻遏蛋白结合于操纵序列O处，乳糖操纵子处于阻遏状态，不能合成分解乳糖的三种酶。

有乳糖存在时，乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构，不能结合于操纵序列，乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶。所以，乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控。

细菌相关功能的结构基因常连在一起，形成一个基因簇。它们编码同一个代谢途径中的不同的酶。一个基因簇受到同一的调控，一开俱开，一闭俱闭。也就是说它们形成了一个被调控的单位。

其它的相关功能的基因也包括在这个调控单位中，例如编码透过酶的基因，虽它的产物不直接参与催化代谢，但它可以使小分子底物转运到细胞中。

ONPG培养基是由邻硝基酚β－D-半乳糖昔(ONPG)等组成的物质。培养基特点：自琼脂斜面上挑取培养物1满环接种，于36±1℃培养1～3h和24h观察结果。如果β－半乳糖苷酶产生，则于1～3h变黄色，如无此酶则24h不变色。