巯基酶的作用(巯基酶是什么)
巯基酶是什么
蛋白酶解:是指蛋白质在各种蛋白酶作用下降解成氨基酸的过程。
细胞内外蛋白质酶解作用的条件不同,细胞内是在中性和酸性pH值下进行,有关的组织蛋白酶主要定位在溶酶体内,可分为A,B,C,D,E和L几种,分子量在25 000(组织蛋白酶B)至100 000(组织蛋白酶E),其中B,B2,C等是巯基酶。在完整细胞内蛋白质降解是受控制的,而且局限在溶酶体内(自体消化);在损伤的细胞内,组织蛋白酶从破坏的溶酶体释放出来,导致自溶作用,是不受控制的过程。
巯基酶所含的巯基来自哪种氨基酸
半胱氨酸含有巯基(-SH),易与汞离子结合。
按照软硬酸碱理论,汞离子属于软酸,容易与软碱发生配合.在蛋白质里出现的大概只有硫了.组成蛋白质的含硫的氨基酸只有两种甲硫氨酸和半胱氨酸.甲硫氨酸有R-S-CH3的侧链,而半胱氨酸含有巯基(-SH),易与汞离子结合.
巯基酶怎么读
Hs是一个化学集团,读作巯基,也称为硫氢基,属于CoA的特征部分。CoA读作“辅酶A”,是一个酶的辅助因子,主要负责乙酰基的传递,在三羧酸循环中有重要作用。值得注意的是其在合成和氧化脂肪酸的角色,和在三羧酸循环中氧化丙酮酸。所有基因组测序日期编码的酶,即利用辅酶A作为底物,并在4%左右的细胞酶中使用(或硫酯,例如乙酰-CoA)作为基材。在人类中,辅酶A生物合成需要半胱氨酸、泛酸和三磷酸腺苷(ATP)。主要参与脂肪酸以及丙酮酸的代谢。
巯基酶对人体的作用
巯基—二巯基交换反应是酶偶联反应的一种,指带一SH或一S一的载体,通过巯基一二巯基的交换反应和酶分子上非必需巯基偶联。当载体的功能基团为巯基时,可先用2,2'—二吡啶二硫化物处理为二巯基,生成的中间产物在酸性条件下,能与酶的巯基发生交换反应使之偶联,同时释放α一硫基吡啶。
巯基又称氧硫基,是由氢和硫两元素组成的一价原子团(一SH),含巯基的化合物称硫醇或巯基化合物。巯基是一个具有特殊生理功能的基团,体内许多重要的酶都依赖半胱氨酸的巯基呈现活性,许多毒性物质如芥子气、重金属等可与巯基结合,呈现毒性,二巯基丙醇可使这些被结合的巯基恢复原来的状态,所以具有解毒作用。
巯基酶的作用机制是什么
巯基—二巯基交换反应是酶偶联反应的一种,指带一SH或一S一的载体,通过巯基一二巯基的交换反应和酶分子上非必需巯基偶联。
当载体的功能基团为巯基时,可先用2,2'—二吡啶二硫化物处理为二巯基,生成的中间产物在酸性条件下,能与酶的巯基发生交换反应使之偶联,同时释放α一硫基吡啶。
巯基酶抑制剂的作用机制
通过体外无细胞系统翻译找出目的基因mRNA以后,变可进行cDNA第一链的合成,其步骤包括:1)在Ependorf管中加50pmol/L的一种α32PdNTP和1mg/ml的mRNA10μl(10μg),100mmol/L甲基氢氧化汞1μl,室温反应l0分钟,使RNA变性。2)加100mmol/L的β-巯基乙醇2μl和10mmol/LRNA酶抑制剂2μl,室温放置5分钟。β-巯基乙醇有稳定逆转录酶活性的作用。3)向上述反应混合物加lmg/ml的引物01igodT(12~18聚体)10μl,1mol/LTris.HCl(pH8.3)5μl,11mol/LKCl7μl,250mmol/LMgCl22μl,再加20mmol/L的4种dNTP各2.5μl,逆转录酶2μl(40单位),用水补充到50μl,充分混匀,42℃反应1~3小时。4)加0.5EDTA(pH8.0)2μl终止反应,然后加150mmol/LNaOH25μl,65℃反应1小时,或37℃8小时,水解mRNA模板,得到cDNA第一链,再加pH8.0,1mmol/LTris.HCl,各25μl中和其pH。5)测定放射活性,计算合成的DNA量。实际上,cDNA第一链的产量往往不会超过poltAmRNA用量的10%~30%。6)用等体积的酚-氯仿抽提―次,取水相并用SephadexG-100离心柱层析(参看第6章)将cDNA同剩余的dNTP分开,以2.5倍体积的95%冷乙醇沉淀。7)合成的cDNA第―链在1.4%的碱性琼脂糖凝胶上电泳,用末端标记的pBR322限制性片段为分子量标准,电泳后,铺X-光片,进行放射自显影,确定cDNA第一链的大小。2:第二链的合成a:第一链合成完毕后,直接进行第二链的合成。在第一链合成体系中分别加入2.5×第二链缓冲液40μl,DNA聚合酶Ⅰ23μRNaseH0.8μ加水至100μlb:14-16℃下放置2小时。(>3Kb时反应时间延长至3-4小时)c:70℃,10min,点动离心,置于冰浴d:在样品管中加入T4DNA聚合酶2μ,37放置10分钟。e:加入4μl500mM的EDTA到该样品管中,然后置于冰浴上.f:等体积加入酚\氯仿\异戊醇抽上清,12000g,3min。g:上清液转移至一干净试管,加2V乙醇,1/10V乙酸钠,-20℃30min沉淀,12000g,15min收集沉淀,70%乙醇洗沉淀,干燥,TE复溶。