免疫印迹中二抗的作用时间(免疫印迹一抗二抗作用)
免疫印迹一抗二抗作用
wb实验是蛋白质印迹又称免疫印迹,是根据抗原抗体的特异性检测的实验。
免疫印迹法一抗二抗
Western Blot(蛋白质印迹或免疫印迹)技术,以蛋白质为检测对象,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。实验采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)将样品蛋白质分离,再转移到固相载体(PVDF尼龙膜或NC膜)上;固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变;然后以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与其对应的抗体(一抗)发生免疫反应,特异性一抗再与和酶耦联的第二抗体反应,最后在酶的作用下,导致底物显色或化学发光显影,来检测电泳分离的特异性目的靶蛋白。
蛋白质印迹技术结合了凝胶电泳分辨力高和固相免疫测定特异性高、敏感等诸多优点,能从复杂混合物中对特定抗原进行鉴别和定量检测。
抗核抗体的免疫印迹法
免疫印迹法 (Western blotting) 是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的杂交技术。
免疫印迹法具有分析容量大、敏感度高、特异性强等优点,是检测蛋白质特性、表达与分布的一种最常用的方法,如组织抗原的定性定量检测、多肽分子的质量测定及病毒的抗体或抗原检测等。
免疫印迹为什么要用二抗
免疫印迹的条带位置代表目的蛋白分子量大小,显色条带灰度值(对比内参)代表目的蛋白的表达量。
蛋白免疫印迹一抗二抗作用
免疫印迹法(immunoblotting test)的缩写IBT。亦称酶联免疫电转移印斑法(enzyme linked immunoelectrotransfer blot,EITB),因与Southern早先建立的检测核酸的印迹方法 Southern blot 相类似,亦被称为Western-blot.。
免疫印迹法 是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。