Cas12a酶作用(cas9酶)
cas9酶
TALENs(transcription activator-like (TAL) effector nucleases)的中文名为转录激活因子样效应物核酸酶,是基因组编辑核酸酶三大类之一。它是实现基因敲除、基因敲入或转录激活等靶向基因组编辑的里程碑。
中文名
talens
外文名
transcription activator-like (TAL) effector nucleases)
特点
比锌指核酸酶(ZFNs)更优越
功能
研究基因功能和潜在基因治疗应用
研发者
美国麻省总医院
基于TALE的基因组编辑技术已经被广泛作用于基因敲除、敲入、转录激活等。GeneCopoeia公司提供TALEN以及最新基因修饰技术CRISPR/Cas9的设计、载体构建、功能验证等服务。
江苏省医药动物实验基地转基因中心基于TALENS和锌指核酸酶ZFN技术建立了快速体细胞基因重组和小鼠敲除技术,可在3个月内获得基因敲除小鼠或是体细胞重组克隆。
Cas9酶功能与什么酶相似
CRISPR (Clustered Regularly Interspersed Short Palindromic Repeats)是细菌用来抵御病毒侵袭/躲避哺乳动物免疫反应的基因系统。科学家们利用RNA引导Cas9核酸酶可在多种细胞(包括iPS)的特定的基因组位点上进行切割,修饰。 Rudolf Jaenisch 研究组将Cas9与Te1和Tet2特异的sgRNA共注射到小鼠的受精卵中,成功得到双基因敲除的纯合子小鼠,效率高达80%。 他们将Cas9/sgRNA 与带突变序列的引物共注射,能准确在小鼠两个基因引入所要的点突变。在ES细胞中他们更是成功的一次敲除了五个基因。与ZFN/TALEN相比,CRISPR/Cas更易于操作,效率更高,更容易得到纯合子突变体,而且可以在不同的位点同时引入多个突变。但该系统是否有脱靶效应尚需进一步的研究。
传统的转基因和基因打靶技术,由于技术稳定成熟,可以对小鼠和大鼠的基因组序列进行各种修饰,仍将是模式动物的构建的主要技术。 核酸酶ZFN/TALEN 尤其是CRISPR/Cas技术如果能解决脱靶效应的话,有可能会广泛应用于小鼠,大鼠及其他模式动物的制备和研究中,成为传统的转基因和基因打靶技术的重要补充。
Cas9酶切位点
回答:crisper技术没有获得诺奖。CRISPR/Cas9是继“锌指核酸内切酶(ZFN)”、“类转录激活因子效应物核酸酶(TALEN)”之后出现的第三代“基因组定点编辑技术”。所谓“基因编辑技术”,就是能够让人类对目标基因进行“编辑”,实现对特定DNA片段的敲除、加入的一项技术。
Cas9酶有特异性吗
Cas12a 是核酸内切酶。
核酸内切酶Cas12a具有切割双链DNA及单链DNA的生物活性。在crRNA (CRISPR-related RNA)的帮助下,Cas12a与待检测的靶标双链DNA结合,构象发生变化,不仅可以特异性地切割靶标DNA,还可以非特异性地切割周围的单链DNA。
Cas9酶英文
中文名称:苯丙二酸;苯基丙二酸 英文名称:Phen 英文别名:Phen
基本信息
CAS登录号:2613-89-0
中文名称:苯丙二酸;苯基丙二酸
英文名称:Phenylmalonic acid
英文别名:Phenylpropanedioc acid
分子式:C9H8O4
分子量:180.16
EINECS登录号:220-044-6
物化性质
熔点:153-155ºC
水溶性:可溶
性质描述
棱状结晶。熔点153-155℃(分解)。溶于水、乙醇、乙醚,微溶于氯仿、二硫化碳、苯。
产品应用
该品是抗菌素类药物羧苄青霉素钠的中间体。
CAS9酶
1. 小写p开头 ,p在这里指代质粒(plasmid),所以我们常常看到pXXXXX-XXXX。
2. 质粒骨架 p后面接上质粒骨架名称,pBACKBONE-XXXX。质粒骨架中包含promoter等等重要信息,一旦你对这个骨架熟悉,通过名称则很快能推测出质粒元件。addgene有专门的Vector Database可供查阅许多已发表或商业化的质粒空骨架信息。
3. 插入的基因名,pBACKBONE-hGene,可以看到h在这里的意思是human。在质粒命名中经常会用小写字母来代替物种,小鼠m,大鼠r等等。对于Cas9会写SpCas9,Sp则意为Streptococcus pyogenes (化脓性链球菌)。
4. 贴Tags,通常插入的基因还会带有flag,需要按照出现顺序给出信息,比如我们前面文章提到的NLS-Cas9-NLS,这意味着Cas9前后各有一个核定位信号NLS,以保证Cas9的和核定位。
5. 标记突变信息,插入的基因时常带有特定突变,因此需要额外标记出来。而突变通常使用氨基酸表示,
如Q295A代表:第295位谷氨酰胺(Glutamine)突变为丙氨酸 (Alanine)。以上是质粒命名的一些通用规则,有时候质粒不一定严格按照以上规则命名,但可以举一反三,窥得其中一些规律。
例子:
(1) pSpCas9(BB)-2A-GFP (PX458):以PX458为骨架,带有SpCas9表达元件,SpCas9后连接有2A-GFP元件,2A用于自我断裂,将Cas9和GFP分开,而GFP则作为筛选标记。
(2) px458_2A_GFP_sgRNA_TIAL1:以PX458为骨架(该骨架带有SpCas9),带有2A-GFP元件用于断裂和筛选,同时表达针对TIAL1基因的sgRNA,因此该质粒可用于TIAL1基因敲除,并且可使用GFP筛选。
(3) pLenti-U6sgbbBsmbI-puro-2A-Fluc:慢病毒骨架质粒,带有U6启动子,奇怪名称sgbbBsmbI(由于这是一个空骨架质粒,盲推这是酶切位点?)的sgRNA,筛选标记是puromycin,同时还会有荧光素酶表达用于体内成像。
Cas9酶正电荷
高锰酸银,又名过锰酸银,是一种无机化合物,化学式为AgMnO4。
基本信息
化学式:AgMnO4
分子量:227.810
CAS号:7783-98-4
EINECS号:232-040-1
理化性质
密度:4.27g/cm3
外观:黑色结晶性粉末[2]
计算化学数据
疏水参数计算参考值(XlogP):无
氢键供体数量:0
氢键受体数量:4
可旋转化学键数量:0
互变异构体数量:0
拓扑分子极性表面积:74.3
重原子数量:6
表面电荷:0
复杂度:95.8
同位素原子数量:0
确定原子立构中心数量:0
不确定原子立构中心数量:0
确定化学键立构中心数量:0
不确定化学键立构中心数量:0
共价键单元数量:2[2]
储存方法
装于棕色试剂瓶中,避光,于阴凉处保存。
用途
用作燃烧法测定有机物中碳和氢的催化氧化剂。[1]