细胞冻存加dmso的作用(细胞冻存加入DMSO)
细胞冻存加入DMSO
能用。
只要是避光保存，DMSO室温下很稳定的，光照会分解。你只要是避光保存了，就没有问题。
DMSO又称为二甲基亚砜，常用作细胞冻存，它可以破坏氢键的形成，从而防止冰晶的形成对细胞造成伤害。也可用作合成纤维的染 色溶剂、去染剂、染色载体,以及回收乙炔、二氧化硫的吸收剂。
细胞冻存可以直接放在-80℃吗
细胞做成冻存管时，如果有程序降温盒，可以直接用程序降温盒于-80℃冻存，过夜转移至液氮中保存形式时。那么，没有时候怎么办呢，顺序依次降温：无菌室室温---4℃，30min(不要超过2小时）---﹣20℃，30-60min（不要超1h,减少冰晶对细胞伤害）---﹣80℃过夜（放﹣80℃最少在6h以上）---液氮保存（要定期观察液氮罐里液氮量，缺少时及时添加）
细胞冻存加入多少冻存液
pbmc冻存液的保存方法
(1)PBMC细胞离心得到细胞沉淀，重悬，滴加2×冻存液，维持细胞悬液的密度为2×107/ml，分装到冻存管中；
(2)放入程序降温仪，逐渐降温至‑90℃后转移至液氮中进行长期保存。
PBMC细胞的复苏方法，包括：
(1)将保存有PBMC细胞的冻存管取出，迅速放入水浴中，反复震荡5～15次，震荡时间控制在3min以内；
(2)细胞悬液用X‑VIVO无血清培养基洗涤，维持细胞密度在1～2×106/ml。
本发明的冻存方法通过程序性降温仪精确控制降温速率，能有效避免冰晶的产生，降低细胞的损伤，显著提高PBMC细胞冻存复苏24h后的冻存复苏活率。
细胞冻存加入DMSO的特性
当然不是~DMSO对细胞有杀伤作用~一般作用浓度要小于千分之一~但要根据细胞种类来定~可以先做一个MTT检测DMSO浓度对该细胞的杀伤作用再确定浓度~一般在冻存细胞加十分之一DMSO防止快速冻存时冰晶产生~
细胞冻存加入血清目的
去掉培养基，用冻存液（可以按照培养基：DMSO:血清=7:2:1自配）重悬细胞后用冻存管放于-80度
细胞冻存加入DMSO的原理是什么?
你好，DMSO是一种细胞保护剂，它的作用机理是在细胞膜上打洞，使细胞内的水分子能渗透出来，从而防治冷冻细胞时，细胞内冰晶的形成，而破坏细胞。所以在做细胞冻存时它是必不可少的，但DMSO又能损伤细胞使用它时需要有一定浓度，一般采用的是终浓度10％就行了。最大浓度药物的DMSO含量是0一般来说，培养基中浓度为小于0.5%就可以了，但据实验观察小于0.25%肯定没有问题。相关要求不超过1%祝你健康
细胞冻存加入DMSO目的
DMSO一般用于细胞冻存保护剂和药物溶剂。
用作细胞保护剂的机理是，DMSO能在细胞膜上打洞，使细胞内的水分子能渗透出来，从而防止细胞冷冻过程中在细胞内形成冰晶、破坏细胞结构。过高浓度的DMSO会对细胞造成损伤，一般冻存操作采用的终浓度是10％。
其用作药物溶剂时，需要考虑DMSO具有诱导白血病细胞向红系分化和抑制某些细胞增殖的作用，可根据实验用的细胞类型做文献调研（一般建议低于0.5%），摸索合适的DMSO的用量。
细胞冻存加入DMSO的量
1、是先把冻存盒放在室温，把细胞放在冻存盒，置于-80度（這样的好处：细胞可以从室温开始缓慢降温）（并且，据说冻存盒的使用本来就是从20度室温开始降）
2、还是将冻存盒先放在4度降温，再将细胞放进去，放于-80（這样的好处：常温下冻存液中DMSO对细胞损伤大，从4度开始降温比较好）
细胞冻存加入二甲亚砜的作用
首先，过氧化氢与次氯酸钠反应产生氧气，次氯酸钠氧化鲁米诺使其发光。次氯酸钠与过氧化氢反应的方程式：氯化钠+H2O2=氯化钠+O2+H2O.
其次，当鲁米诺与氢氧化物反应时，它会产生双负离子（Dianion),该负离子可以被从过氧化氢分解的氧气氧化，产物是有机过氧化物。这种过氧化物非常不稳定，立即分解成氮（鲁米诺被有机氧化剂如二甲基亚砜氧化，产生的不是氮，而是含氮的有机物），导致3-氨基邻苯二甲酸的激发态。在从激发态到基态的过渡中，释放的能量以光子的形式存在，波长位于可见光的蓝色部分。
细胞冻存加入胰酶多少
流式测细胞周期前，如何固定细胞？实验室做流式的时间固定一周的两天，所以细胞只好收集起来固定几天后再做，那么一般用什么方法来固定时间了？以下是我为大家收集的几个处理方法：
一、用冰乙醇固定的问题：
1，PBS洗涤2次。
2，离心时采取800～1000rpm 5min（我不知道离心力是多少）。我们没有要求4度离心。（效果一样。）
3，细胞数的要求不是很严，我们可以这样估计一下：流式最终上机需要至少6000～10000个细胞，调试仪器如果需要20000个的话（做周期很好调的）一共是30000个细胞。做染色要PBS洗2次，pc buffer后洗一次，共3次，按每次损失20％（实际上没有这么多，只要操作小心，我们实验室的高手做Annexin V据说只用1w个细胞就可以开始做！！！其实也就是少丢弃细胞的意思）计算，需要不超过5w个，固定时洗涤两次，最多不超过8w个细胞，也就是说，1*10-6个细胞足以！！实际上操作也是这样，细胞数过多，如果染色的时候不舍弃一些的话，会造成染色剂相对不足以及容易堵管。因此在做染色时需要调整细胞数。
4，我们实验室用软试管将加入冰乙醇的细胞封口，－20度保存，保存3个月没问题（我最长做的是3个月，老师们说半年没问题）。EP管如果封口严密也没有问题。
二、70%预冷酒精固定：
(注意控制细胞数量,大约1,000,000个左右,)
1, 细胞消化后用PBS洗一次,(最好用DMEM+胰酶消化,否则细胞不容易成但单细胞,且消化过程中不要去移动瓶子)
2,用200微升PBS制成细胞悬液,加预冷的70%酒精2毫升,边加边摇匀,后置4度冰箱,一般一个小时就差不多了,跟培养时间应该没多少关系
3,弃上清,PBS洗一次,然后加400微升PBS成细胞悬液,然后加50微升PI.后避光，送检。