提dna各试剂作用(dna提取过程中各试剂的作用)
dna提取过程中各试剂的作用
1、 裂解液要预热,以抑制DNase,加速蛋白变性,促进DNA溶解.
2、 酚一定要碱平衡.苯酚具有高度腐蚀性,飞溅到皮肤、粘膜和眼睛会造成损伤,因此应注意防护.氯仿易燃、易爆、易挥发,具有神经毒作用,操作时应注意防护.
3、 各操作步骤要轻柔,尽量减少DNA的人为降解.
4、 取各上清时,不应贪多,以防非核酸类成分干扰.
5、 异丙醇,乙醇.NaAc,KAc等要预冷,以减少DNA的降解,促进DNA与蛋白等的分相及DNA沉淀.
6、 提取DNA过程中所用到的试剂和器材要通过高压烤干等办法进行无核酸酶化处理.
7、 所有试剂均用高压灭菌双蒸水配制.
dna提取过程中各种试剂的作用
1、裂解液要预热,以抑制DNase,加速蛋白变性,促进DNA溶解。
2、酚一定要碱平衡。苯酚具有高度腐蚀性,飞溅到皮肤、粘膜和眼睛会造成损伤,因此应注意防护。氯仿易燃、易爆、易挥发,具有神经毒作用,操作时应注意防护。
3、各操作步骤要轻柔,尽量减少DNA的人为降解。
4、取各上清时,不应贪多,以防非核酸类成分干扰。
5、异丙醇,乙醇.NaAc,KAc等要预冷,以减少DNA的降解,促进DNA与蛋白等的分相及DNA沉淀。
6、提取DNA过程中所用到的试剂和器材要通过高压烤干等办法进行无核酸酶化处理。
7、所有试剂均用高压灭菌双蒸水配制。
提取DNA的试剂
染色体的成分有蛋白质,DNA,RNA 可以分别用双缩脲试剂, 紫色,鉴定蛋白质 甲基绿 绿色 鉴定DNA 吡罗红/派洛宁 红色 鉴定RNA
dna提取溶液作用
用无水乙醇沉淀DNA,这是实验中最常用的沉淀DNA的方法。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶,乙醇与核酸不会起任何化学反应,对DNA很安全,因此是理想的沉淀剂。 DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺去DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。 一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混合,其乙醇的最终含量占67%左右。因而也可改用95%乙醇来替代无水乙醇(因为无水乙醇的价格远远比95%乙醇昂贵)。但是加95%的乙醇使总体积增大,而DNA在溶液中有一定程度的溶解,因而DNA损失也增大,尤其用多次乙醇沉淀时,就会影响收得率。折中的做法是初次沉淀DNA时可用95%乙醇代替无水乙酵,最后的沉淀步骤要使用无水乙醇。也可以用0.6倍体积的异丙醇选择性沉淀DNA。一般在室温下放置15-30分钟即可。
分析说明各种试剂在基因组DNA提取中的作用
主要成分是:NaCl,Tris-HCl(PH=8),EDTA(PH=8),SDS.NaCl,Tris-HCl主要是调节溶液的PH,维持一定的离子浓度.EDTA主要是二价金属离子的螯合剂,使影响DNA的DNA酶中的钙离子和镁离子和EDTA结合,使酶失去活性,有利于提取完整DNA;
SDS主要是和蛋白质结合,使其变形沉淀,从而利于DNA的提取,减少和清除带白质杂质!
dna提取过程中样品提取液的作用是什么
PCR模板就是含有所需扩增片段的DNA。必须有一段DNA在里面,引物扩增的时候才能结合到模板DNA上,在聚合酶作用下去合成新的互补链,实现扩增的目的。 模板来源有很多种,从样品中提取质粒DNA,基因组DNA等等。
dna提取液中各成分的作用
solution1就是提供一个裂解菌体的溶液~有一些蛋白质变性剂去垢剂葡萄糖做调解渗透压的作用~
solution2就是碱性的致使核酸(基因组DNA加质粒DNA)发生变性的溶液~solution3就是用来中和2的碱性的溶液~使得质粒可以复性而基因组DNA则不能~所以经离心就可以把质粒分离开来了~