sds裂解液中各成分作用(sds细胞裂解液配方)

sds细胞裂解液配方

SDS（十二烷基苯磺酸钠）是一种阴离子去垢剂，在高温条件下能裂解细胞，使染色体离析、蛋白变性，同时SDS与蛋白质和多糖结合成复合物，释放出核酸。

sds裂解法提取质粒

实验室用公司试剂盒提取质粒，一般采用的是碱裂解法。比如从大肠杆菌的菌液中提取，基本原理是先加入RNA酶，把RNA去掉，然后用碱裂解菌体，用酸平衡，并且SDS和蛋白质结合形成沉淀，顺便把与蛋白结合的基因组DNA沉淀下来。

最后上清中含有质粒DNA，把它过柱洗脱下来溶到水中就完成了质粒的提取。

SDS裂解液配方

SDS分子结构式: C12H25SO4Na

十二烷基硫酸钠 化学品中文名称: 十二烷基硫酸钠 英文名称: dodecyl sulfate,sodium salt 简称:SDS 技术说明书编码: 2036 CAS No.: 151-21-3 分子式: C12H25SO4Na 分子量: 288.38 SDS是一种已知的能够使蛋白质变性的去污剂.它用于确定蛋白分子量的聚丙烯酰胺凝胶电泳.它也可以用于核酸抽提操作中破坏细胞壁及裂解核酸:蛋白复合物.在乳液聚合反应中,可充当两相溶液的乳化剂.

SDS裂解蛋白

这是不同的裂解液配方 都是裂解细胞提取蛋白用的 SDS在配胶的时候也会用到

sds蛋白裂解液配方

原理：SDS：使细胞裂解，使与DNA双链紧密相连的组蛋白分开和变性。

EDTA：可以与镁离子螯合，从而有助于阻止核酸分子间的聚集，及核酸与蛋白质分子的聚集，与SDS一样，还可抑制核酸酶的活性。

蛋白酶K：水解蛋白质，在SDS存在下活性增强，不受EDTA的抑制，在较高温度下仍有活性。

苯酚/氯仿：去除变性的蛋白质及多糖、脂类等杂质。

SDS裂解细胞膜

植物DNA的提取

1、目的要求

学习从新鲜的叶片中提取植物总DNA的方法。

2、实验原理

本实验介绍的就是一种快速简便提取植物总DNA的方法：先将新鲜的叶片在液氨中研磨，以机械力破碎细胞壁，然后加入十六烷三甲基溴化铵（简称CBA,是一种阳离子去污剂)分离缓冲液，使细胞膜破裂，同时将核酸与植物多糖等杂质分开。再经氯仿-异戊醇提取去除蛋白，即可得到适合于酶切的DNA。

3、试剂和器材

一、试剂

CTBA抽提缓冲液：2%CTBA.100mmolL Tris-HCl,pH8.0;20mmolL EDTA;1.4molL

NaCl;0.2%(vv)巯基乙醇共100mL:称取2 g CTBA,8.18 g NaCI,0.74 g EDTA Na22H20,加入10mL1molL的Tris-HCl,pH8.0,0.2mL的巯基乙醇，加水定容至100mL.

TE:TrisEDTA缓冲液：10mmolL Tris-HCl,pH8.0;1mmolL EDTA。

异丙醇：乙醇：氯仿一异戊醇(24：1，V:V):液氮。

二、材料

新鲜植物叶片。

三、材

研钵：离心机：恒温水浴。

4、操作方法

1.称取lg新鲜叶片，置于预冷的研钵中，倒入液氮，将叶片研至粉末。

2.将叶片粉末转入一个30mL离心管中。

3。加10 mL CTBA抽提缓冲液，轻轻转动离心管使之混匀。于65℃温育10min。加入等体积的氯仿一异戊醇，轻轻颠倒混匀。

4.室温下4000rmin离心10min,回收上层水相。在回收的上层水相中。

5。加入23体积预冷的异丙醇（预冷至一20℃），轻轻混匀，置冰箱中放置数小时梦至过夜，使核酸沉淀下来。

6.室温下4000rmin离心10min。

7.小心倒去上清液，用80%乙醇洗涤沉淀物.尽量沥干乙醇，置于真空干燥器内干称重，计算产率。

8.将DNA沉淀溶于1mLTE中。

sds提取液配方

药品试剂及耗材： —— 液氮 —— 提取缓 冲液：500 mmol/L NaCl, 100 mmol/L Tris-HCl ph8, 50 mmol/L EDTA ph8，10 mmol/L 2-巯基乙醇（用前加入） ---- 20% SDS ph7.2 ---- 5 mol/L KAc ---- 氯仿：异戊醇（24：1） —— 异丙醇 —— 70%乙醇 —— TE缓冲液 :10 mmol/L Tris-HCl,1 mmol/L EDTA,PH8.0

sds裂解细菌

大质粒(大于15kb)容易受损，故应采用漫和裂解法从细胞中释放出来。将细菌悬于蔗糖等渗溶液中，然后用溶菌酶和edta进生处理，破坏细胞壁和细胞外膜，再加入sds一类去污剂溶解球形体。这种方法最大限度地减小了从具有正压的细菌内部把质粒释放出来所需要的作用力。

提取过程中的机械力可能使大分子dna断裂成小片段，所以为保证dna的完整性，各步操作均应较温和，避免剧烈震荡。如尽量减少酚/氯仿抽提、混匀过程要轻缓,以保证得到较长的dna。

sds细胞裂解液的作用

SDS：十二烷基磺酸钠（Sodium dodecyl sulfate，SDS），是洗洁精的主要成分。常用于DNA提取过程中使蛋白质变性后与DNA分开。SDS是一种已知的能够使蛋白质变性的去污剂。它用于确定蛋白分子量的聚丙烯酰胺凝胶电泳。它也可以用于核酸抽提操作中破坏细胞壁及裂解核酸-蛋白复合物。在较高温度下，破坏蛋白质与DNA的结合，使DNA释放出来。SDS是一种白色或淡黄色微粘物，工业上常用于洗涤剂和纺织工业。属阴离子表面活性剂。易溶于水，与阴离子、非离子复配伍性好，具有良好的乳化、发泡、渗透、去污和分散性能，广泛用于牙膏、香波、洗发膏、洗发香波、洗衣粉、液洗、化妆品和塑料脱模，润滑以及制药、造纸、建材、化工等行业。