提取色素各试剂的作用(提取色素各试剂的作用是什么)

提取色素各试剂的作用是什么

光合色素易溶于无水乙醇等有机溶剂中，可以用无水乙醇提取绿叶中的光合色素。

光合色素可溶于层析液中，不同的光合色素在层析液中的溶解度不同。溶解度高的光合色素随层析液在滤纸上扩散得快；溶解度低的光合色素在滤纸上扩散得慢。这样，最终不同的光合色素会在扩散过程中分离开来。

提取色素和分离色素所用的试剂分别是什么

中学生物用无水乙醇或丙酮提取，利用色素容易溶解在有机溶剂中的特点提取。相比较丙酮有一定毒性。用99%以上的酒精，普通的不行。

色素的分离和提取实验试剂的作用

分离光合色素的试剂：用层析液分离。用有机溶剂无水乙醇，或95%乙醇溶液，还可以用乙醚，丙酮代替。 分离光合色素的原理：不同的色素在有机物中溶解度不同，因此移动速率不一样。

溶解度高的光合色素随层析液在滤纸上扩散得快；溶解度低的光合色素在滤纸上扩散得慢。这样，最终不同的光合色素会在扩散过程中分离开来。

提取色素各试剂的作用是什么呢

纸层析法。色素在滤纸条上能分离的原因是四种色素随着层析液在滤纸上的扩散速度不同。四条色素带从上到下依次为胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a，叶绿素b。

1纸层析法原理

纸层析法依据极性相似相溶原理，是以滤纸纤维的结合水为固定相，而以有机溶剂作为流动相。由于样品中各物质分配系数不同，因而扩散速度不同，从而达到分离的目的。

试样经层析后可用比移值（Rf）表示各组成成分的位置（比移值=原点中心至色谱斑点中心的距离与原点中心至流动相前沿的距离之比），由于影响比移值的因素较多，因此一般采用在相同实验条件下对照物质对比以确定其异同。

作为单体鉴别时，试样所显主色谱斑点的颜色（或荧光）与供置，应与对照（标准）样所显主色的谱斑点或供试品-对照品（1∶1）混合所显的主色谱斑点相同。作为质量指标（纯度）检查时，可取一定量的试样，经展开后，按各单体的规定，检视其所显杂质色谱斑点的个数或呈色（或荧光）的强度。作为含量测定时，可将色谱斑点剪下洗脱后，再用适宜的方法测定，也可用色谱扫描仪测定。

提取色素常用的化学试剂

植物色素类常作为杂质除去，如在制备生物制剂或提取有效成分时加水稀释而使叶绿素析出，水溶性色素可用醋酸铅试剂沉淀或活性炭吸附除去。

随着科学研究的深入，已发现不少色素具药用价值，如紫草的萘醌类色素能抑菌，红花中的红花红素与红花黄素能活血化瘀与抗氧化，姜黄中的姜黄素（curcumin）能降血脂和抑菌，栀子中的栀子黄色素（gardenin）能抑菌。

提取色素的提取剂

我是搞生物研究，从专业角度回答你的问题，综合各方因素，经济，简便操作，易于获取等方面，考虑到实验无需过于精确，故此处采用第一种方法，以下是其详细说明：提取: (1) 取菠菜或其他植物新鲜叶片4-5片(2g左右)，洗净，擦干，去掉中脉剪碎，放入研。(2) 研钵中加入少量石英砂及碳酸钙粉，加2-3ml 95%乙醇，研磨至糊状，再加10-15ml 95%乙醇，离心35min，提取上清液过滤于三角瓶中，残渣用10ml 95%乙醇冲洗，一同过滤于三角瓶中。(3) 如无新鲜叶片，也可用事先制好的叶干粉提取。取新鲜叶片(以菠菜叶最好)，先用105℃杀青，再在80℃下烘干，研成粉末，密闭储存。用时称叶粉2g放入小烧杯中，加95%乙醇20-30ml 浸提，并随时搅动。待乙醇呈深绿色时，滤出浸提液备用。分离: (1) 取圆形定性滤纸一张(直径11cm)，将其剪成滤纸条(9cm×3cm)，用滴管吸取乙醇叶绿体色素提取液，沿纸条的长度方向涂在纸条的一边(距边约1cm)，使色素扩散的宽度限制在0.5cm以内，风干后，再重复操作数次。(2) 在层析缸中加入适量的推动剂，将滤纸条带有色素的一端插入层析缸中，使滤纸条下端浸入推动剂中。迅速盖好层析缸盖。此时，推动剂借毛细管引力顺滤纸条向上扩散，并把叶绿体色素向上推动，不久即可看到各种色素的条带。(3) 当推动剂前沿接近滤纸边缘时，取出滤纸，风干，即可看到分离的各种色素:叶绿素a为蓝绿色，叶绿素b为黄绿色，叶黄素为鲜黄色，胡萝卜素为橙黄色。用铅笔标出各种色素的位置和名称。

各种色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的随层析液在滤纸上扩散的快，反之则慢。最快:胡萝卜素次之:叶黄素次之:叶绿素A 最慢:叶绿素B 最宽的是叶绿素A 最窄的是胡萝卜素胡萝卜素和叶绿素B最远叶绿素A和叶绿素B最近另外，绿叶中的色素中叶绿素含量约占3/4 类胡萝卜素含量约占1/4 光照中，红光有利于淀粉合成，蓝紫光有利于蛋白质的合成以下是实验改进方面要求：1 实验材料的改进：应根据不同地区不用气候选用不同叶片，但切记一点不用含蜡质叶片2：提取液的改进：丙酮易挥发且有毒，可选用无水乙醇替代3：层析液改进：一般教材给出两种配方：93号汽油或者20份石油醚+2份丙酮+1份苯，经研究发现以下四种方法较好：

1：CCI4+少许NASO4

2: 95%酒精

3：9份95%酒精+1份苯

4: 20份汽油+2份丙酮+2份石油醚+1份苯

提取色素的试剂分离色素的试剂

丙酮。

叶绿素提取的准备工作是在一个半暗的房间里，室温保持在25℃。提取步骤如下：

(1) 取1000克新鲜的绿叶，在韦氏搅切器中粉碎。

(2)将粉碎的1000克绿叶放进加有少量的碳酸钙的丙酮中(温度20℃)进行萃取，直到过滤、清洗后的叶子碎片为无色。

(3)将过滤后的丙酮提取液放到盛有1升石油醚和100ml丙酮的漏斗中，然后轻轻地旋转，同时加放蒸馏水直到分层为止。水层的大部分丙酮和水溶杂质被丢弃，只剩石油醚溶液。

(4)将石油醚溶液用蒸馏水再次净化后，用含有石油醚和0.01克草酸的200ml80%的甲醇溶液清洗5次以上，最后得到黄绿色悬浮液。

(5)用无水硫酸钠对悬浮液进行干燥，并将其渗入到3cm厚的蔗糖粉末制成柱中，然后用石油醚清洗沉淀的色素去掉类胡萝卜素，使之只含有天然的叶绿素。

(6)含有天然叶绿素的蔗糖柱分两层，绿层有4-10mm的叶绿素b层，另一蓝层为2-6mm的叶绿素a层。

(7)将位于蓝层正中的部分(约占蓝层的一半) 放入醚中，对此悬浮液进行过滤、洗提，用蒸馏水清洗，用硫酸钠干燥，再用器皿进行过滤后，得到叶绿素a。

(8)将(6)中的绿层中间部分移出，迅速放入醚中过滤、洗提，制成叶绿素b醚溶液。

色素的提取用的试剂是什么

1、吕氏(Loeffler)美蓝染色液

A液：美蓝(Methylene blue) 0.3 克95%酒精 毫升

B液：氢氧化钾(KOH) 0.01 克蒸馏水 100 毫升分别配制A液和B液，然后混合即成。

2、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液

A液：碱性复红(Basic fuchsin) 0.3 克95%酒精 10.O 毫升

B液：石炭酸(苯酚) 5.0 克蒸馏水 95 毫升

将碱性复红溶于95%酒精中，配成A液。将石炭酸溶于蒸馏水中，配成B液。将两者混合即成。

3、结晶紫染色液(Huclker改订)

A液：结晶紫(Crystai violet) 2.5 克95%酒精 25.0 毫升

B液：草酸铵(NH4)2C2O4H2O 1.0 克蒸馏水 100 毫升

将结晶紫研细后，加入95%酒精，使之溶解，配成A液。将草酸铵溶于蒸馏水，配成B液。两液混合即成。

4、路戈氏(LugoI)碘液(革氏鉴别染色用)：碘 1.0克碘化钾 2.0克蒸馏水 300毫升

先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，再将碘溶于碘化钾溶液中，溶时可稍加热，最后加足蒸馏水量。

5、番红染色液(革氏鉴别染色用)番红O(Safranin O) 2.0克 蒸馏水 100毫升

6、孔雀绿染色液(芽孢染色用)孔雀绿(Malachite green) 5.0克蒸馏水 100毫升先将孔雀绿研细，加少许95%酒精溶解，再加蒸馏水。

7、Dorner黑素液(英膜染色用)黑素(Nigrosin) 10.0克蒸馏水 100毫升福尔马林(40%甲醛) 0.5毫升将黑素在蒸馏水中煮沸5分钟，加入福尔马林作为防腐剂，用玻璃棉过滤。

8、刚果红染色液 ：刚果红(Congo red) 2.0 克蒸馏水100ml

9、稀释结晶紫染液(放线菌染色用)结晶紫染色液(同3) 5.0毫升蒸馏水 95.0

10、乳酸石碳酸棉蓝染色液（真菌制片，短期保存）石炭酸 10.0克 甘油 20.0毫升乳酸(比重l.21) 10.0毫升 棉蓝 0.02克蒸馏水 10.0毫升将碳酸加在蒸溜水中加热溶化，加入乳酸和甘油，最后加入棉蓝，溶解即成。

11动物组织石蜡切片染色方法

苏木精-伊红(HE)染色：二甲苯Ⅰ, Ⅱ各10 min，依次进入无水乙醇、950 mL/L, 900 mL/L, 800 mL/L及700 mL/L的酒精各5 min，蒸馏水洗；入苏木精染液10 min，盐酸酒精分色4 s，自来水洗10 min；依次入700 mL/L, 800 mL/L及900 mL/L酒精各5 min，入伊红染液染色10 min；入950 mL/L及无水乙醇Ⅰ, Ⅱ各5 min, 以二甲苯透明，中性树脂封片.

一、常用染色液的配制

⒈ 碘-碘化钾（I2-KI）溶液 能将淀粉染成蓝紫色，蛋白质染成黄色，也是植物组织化学测定的重要试剂。

配方：碘化钾2g ； 蒸馏水300ml ； 碘1g

先将碘化钾溶于少量蒸馏水中，待全溶解后再加碘，振荡溶解后稀释至300mL，保存在棕色玻璃瓶内。用时可将其稀释2-10倍，这样染色不致过深，效果更佳。

⒉. 苏丹Ⅲ（sudanⅢ或Ⅳ） 能使木栓化、角质化的细胞壁及脂肪、挥发油、树脂等染成红色或淡红色，是著名的脂肪染色剂。

配方：（1）苏丹III或苏丹Ⅳ干粉0.1g ； 95％酒精10ml ； 过滤后再加入10ml甘油

（2）先将0.1g苏丹III或IV溶解在50ml丙酮中，再加入70%酒精50ml。

（3）苏丹III 70%乙醇的饱和溶液。

⒊. 1％醋酸洋红（aceto carmine）: 酸性染料，适用于压碎涂抹制片，能使染色体染成深红色，细胞质成浅红色。

配方：洋红1g ； 45％醋酸100ml

煮沸2h左右，并随时注意补充加入蒸馏水到原含量，然后冷却过滤，加入4％铁明矾溶液1～2滴（不能多加，否则会发生沉淀），放入棕色瓶中备用。

⒋ 改良苯芬品红染色液（Carbol fuchsine）: 核染色剂。

配制步骤： 先配成三种原液，再配成染色液。

原液A：3g碱性品红溶于100ml 70％酒精中。

原液B：取原液A10ml加入到90ml 5％石炭酸水溶液中。

原液C：取原液B 55ml，加入6ml冰醋酸和6ml福尔马林（38％的甲醛）。

（原液A和原液C可长期保存，原液B限两周内使用）

染色液：取C液10～20ml，加45％冰醋酸80～90ml，再加山梨醇1~1.8g，配成10％～20％浓度的石炭酸品红液，放置两周后使用，效果显著（若立即用，则着色能力差）。

适用范围：适用于植物组织压片法和涂片法，染色体着色深，保存性好，使用2～3年不变质。山梨醇为助渗剂，兼有稳定染色液的作用，假如没有山梨醇也能染色，但效果较差。[/sell]

⒌ 中性红（neutral red）溶液 :用于染细胞中的液泡，可鉴定细胞死活。

配方：中性红0.1g ； 蒸馏水100ml

使用时再稀释10倍左右。

⒍ 曙红Y（伊红，eosin Y）酒精溶液 常与苏木精对染，能使细胞质染成浅红色，起衬染作用。

配方：曙红0.25g ； 95％酒清100ml

也常用于95％酒精脱水时，加入少量曙红溶液，其目的是在包埋、切片、展片、镜检时便于识别材料。

⒎ 钌红（ruthenium red）染液 钌红是细胞胞间层专性染料，其配后不易保存，应现用现配。

配方：钌红5～10mg ； 蒸馏水25-50ml

⒏ 龙胆紫（gentian violet） 为酸性染料，适用于细菌涂抹制片。

配方：龙胆紫0.2~1 g ； 蒸馏水100ml

⒐ 苯胺兰（aniline blue）溶液 :为酸性染料，对纤维素细胞壁、非染色质的结构、鞭毛等，尤其是染丝状藻类效果好。还多用于与真曙红作双重染色，对于高等植物多用于与番红作双重染色。

配方：苯胺兰1 g ； 35％或95％酒精100ml

⒑ 间苯三酚（phloroglucin）溶液 用于测定木质素。

配方：间苯三酚5g ； 95％酒精100ml

注：此溶液呈黄褐色即失效。

⒒ 橘红G（orange G）酒精溶液 为酸性染料，染细胞质，常作二重或三重染色用。

配方：橘红G 1g ； 95％酒精100ml

⒓ 番红（safranin O） 为碱性染料，适用于染木化、角化、栓化的细胞壁，对细胞核中染色质、染色体和花粉外壁等都可染成鲜艳的红色。并能与固绿、苯胺兰等作双重染色，与橘红G、结晶紫作三重染色。

配方：（1）番红水溶液 番红0.1或1 g ；蒸馏水100ml

（2）番红酒精溶液 番红0.5或1 g ；50％（或95％）酒精100ml

（3）苯胺番红酒精染色液

甲液 番红5 g +95％酒精50ml

乙液 苯胺油20ml +蒸馏水450ml

将甲、乙二溶液混合后充分摇均匀，过滤后使用。

⒔ 固绿（fast green） 又称快绿溶液。为酸性染料，能将细胞质，纤维素细胞壁染成鲜艳绿色，着色很快，故要很好的掌握着色时间。

配方：（1）固绿酒精液 固绿0.1 g ； 95％酒精100ml

（2）苯胺固绿酒精液 固绿 1 g ；无水酒精 100ml ；苯胺油 4ml

配后充分摇匀，过滤后使用。现配现用效果好。

⒕ 苏木精（hematoxylin）染液 苏木精是植物组织制片中应用最广的染料，是苏木科植物苏木的心材提取出来的。它是很强的细胞核染料，而且可以分化出不同颜色。配方很多，现举海登汉氏（Heidenhain's）苏木精染色液，又称铁矾苏木精染色液。

配方：甲液（媒染剂）： 硫酸铁铵（铁明矾）2-4g ；蒸馏水100ml

（必须保持新鲜，最好临用之前配制）

乙液（染色剂）：苏木精 0.5-1g ；95％酒精 10ml；蒸馏水 90ml

配制步骤：（1）将苏木精溶于酒精中，瓶口用双层纱布包扎，使其充分氧化（通常在室内放置两个月后方可使用）。（2）加入蒸馏水，塞紧瓶口，置冰箱中可长期保存。

切片需先经甲液媒染，并充分水洗后才能以乙液染色，染色后经水稍洗再用另一瓶甲液分色至适度。

铁矾苏木精染液为细胞学上染细胞核内染色质最好的染色剂，但要注意甲液与乙液在任何情况下决不能混合。

⒖亚甲基蓝染液 常用于细菌、活体细胞等的染色。

取0.1g亚甲基蓝，溶于100ml蒸馏水中即成。

⒗詹纳斯绿B（Janus green B）染液

将5.18gJanus 绿溶于100ml蒸馏水，配成饱和水溶液。用时需稀释。稀释的倍数应视材料不同而异。

⒘硫堇染液

取0.25克硫堇(也称劳氏青莲或劳氏紫)粉末，溶于100ml蒸馏水中，即可使用。使用此液时，需要用微碱性自来水封片或用1%NaHCO3水溶液封片，能成多色反应。

18.黑色素液

水溶性黑素10g，蒸馏水100mL，甲醛(福尔马林)0.5mL。可用作荚膜的背景染色。

19.墨汁染色液 ：国产绘图墨汁40mL，甘油2mL，液体石炭酸2mL。先将墨汁用多层纱布过滤，加甘油混匀后，水浴加热，再加石炭酸搅匀，冷却后备用。用作荚膜的背景染色。

20.吕氏(Loeffier)美蓝染色液

A液：美蓝(methylene blue,又名甲烯蓝)0.3g，95%乙醇30mL;

B液：0.01%KOH100mL。

混合A液和B液即成，用于细菌单染色，可长期保存。根据需要可配制成稀释美蓝液，按1∶10或1∶100稀释均可。

21.革兰氏染色液

(1)结晶紫(cristal violet)液：结晶紫乙醇饱和液(结晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL，1%草酸铵水溶液80mL。将两液混匀置24h后过滤即成。此液不易保存，如有沉淀出现，需重新配制。

(2)芦戈(Lugol)氏碘液：碘1g，KI 2g，蒸馏水300mL。先将KI溶于少量蒸馏水中，然后加入碘使之完全溶解，再加蒸馏水至300mL，即成。配成后贮于棕色瓶内备用，如变为浅黄色 能使用。

(3)95%乙醇：用于脱色，脱色后可选用以下(4)或(5)的其中一项复染即可。

(4)稀释石炭酸复红溶液：碱性复红乙醇饱液(碱性复红1g，95%乙醇10mL，5%石炭酸90mL)10mL，加蒸馏水90mL。

(5)番红溶液：番红O(safranine O，又称沙黄O)2.5g，95%乙醇100mL，溶解后可贮存于密闭的棕色瓶中，用时取20mL与80mL蒸馏水混匀即可。

以上染色液配合使用，可区分出革兰氏染色阳性(G+ )或阴性(G- )细菌，前者蓝紫色，后者淡红色。

22.齐氏(Ziehl)石炭酸复红液：碱性复红0.3g溶于95%乙醇10mL中为A液；0.01%KOH溶液100mL为B液。混合A、B液即成。

23.姬姆萨(Giemsa)染液

(1)贮存液：称取姬姆萨粉0.5g，甘油33mL，甲醇33mL。先将姬姆萨粉研细，再逐滴加入甘油，继续研磨，最后加入甲醇，在56℃放置1-24h后即可使用。

(2)应用液(临用时配制)：取1mL贮存液加19mLpH7.4磷酸缓冲液即成。也可以贮存液∶甲醇=1∶4的比例配制成染色液。

24. 1%瑞氏(Wright's)染色液

称取瑞氏染色粉6g，放研钵内磨细，不断滴加甲醇(共600mL)并继续研磨使溶解。经过滤后染液须贮存一年以上才可使用，保存时间愈久，则染色色泽愈佳。

提取光合色素常用的试剂

1．材料：

新鲜的绿色叶片（如菠菜叶，南方学校也可尝试用朱槿叶）

2．用具

：定性滤纸，棉塞，试管，试管架，研钵，玻璃漏斗，尼龙布，毛细吸管，剪刀，药勺，天平，10

ml量筒。

3．试剂及其他药品：

无水乙醇，层析液，二氧化硅，碳酸钙。

【实验原理】

光合色素易溶于无水乙醇等有机溶剂中，可以用无水乙醇提取绿叶中的光合色素。

光合色素可溶于层析液中，不同的光合色素在层析液中的溶解度不同。溶解度高的光合色素随层析液在滤纸上扩散得快；溶解度低的光合色素在滤纸上扩散得慢。这样，最终不同的光合色素会在扩散过程中分离开来。