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胶体金法氧化作用(胶体金法使用方法)

更新:2022-11-21 02:24编辑:bebe归类:心理健康人气:93

胶体金法使用方法

用容量瓶量取200ml超纯水加入到 500ml锥形瓶中,将锥形瓶置于磁力加热搅拌器加热板上,放入磁力搅拌子,打开搅拌旋钮至适当速度。用移液器吸取2ml 1%氯金酸溶液于上述 200ml超纯水中,搅拌1min,关闭搅拌旋钮,打开加热旋钮,加热至沸腾。打开搅拌旋钮至适当速度,快速加入经微孔滤膜过滤。1% 柠檬酸三钠溶液0.8ml,溶液在2分钟内由灰色变黑色最后变为红色,再继续加热搅拌 10分钟。关掉加热旋钮,适当速度搅拌至室温,定容至200ml,4~C保存。

抗原检测试剂盒胶体金法使用方法

金标法:又称胶体金法、一步法,医学上的名称为斑点免疫金渗滤试验。.金标法是一种常用的标记技术,是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。

金标法是国际上较为先进的体外诊断方法,近年来金标法(胶体金法)已在各种生物学研究中广泛使用,在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记,同时在流式、电镜、免疫、分子生物学以至生物芯片中都可能例用到。

它拥有如下几个特点:

(1)灵敏度高;

(2)特异性强;

(3)快速;

(4)简便;

(5)准确32313133353236313431303231363533e78988e69d8331333332636362率高。

1971年Faulk 和Taytor将胶体金引入免疫化学,此后免疫胶体金技术作为一种新的免疫学方法,在生物医学各领域得到了日益广泛的应用。目前在医学检验中的应用主要是免疫层析法( immunochromatogra-phy)和快速免疫金渗滤法(Dot-immuogold filtration assay DIGFA),用于检测 HBsAg、HCG 和抗双链DNA抗体等,具有简单、快速、准确和无污染等优点。

免疫胶体金技术的基本原理:

胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,可聚合成一定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,形成带负电的疏水胶溶液,由于静电作用而成为稳定的胶体状态,故称胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白质的生物特性。

胶体金除了与蛋白质结合以外,还可以与许多其它生物大分子结合,如SPA、PHA、ConA等。根据胶体金的一些物理性状,如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应,加上结合物的免疫和生物学特性,因而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。

胶体金标记,实质上是蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面的包被过程。吸附机理可能是胶体金颗粒表面负电荷,与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。用还原法可以方便地从氯金酸制备各种不同粒径、也就是不同颜色的胶体金颗粒。这种球形的粒子对蛋白质有很强的吸附功能,可以与葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白、毒素、糖蛋白、酶、抗生素、激素、牛血清白蛋白多肽缀合物等非共价结合,因而在基础研究和临床实验中成为非常有用的工具。

免疫金标记技术(Immunogold labelling techique) 主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性,在金标蛋白结合处,在显微镜下可见黑褐色颗粒,当这些标记物在相应的配体处大量聚集时,肉眼可见红色或粉红色斑点,因而用于定性或半定量的快速免疫检测方法中,这一反应也可以通过银颗粒的沉积被放大,称之为免疫金银染色。

胶体金法操作方法

胶体金的最大优点就是快速,方便。但是缺点也很明显—通量不高而且试纸的准确性高度依赖于抗体的特异性(抗体特异性不好容易有交叉反应)。胶体金法有其独特的优点,近年已在各种生物学研究中广泛使用.在临床使用的免疫印迹技术几乎都使用其标记。

胶体金法注意事项

石英砂可以用石材类胶水粘住。这个胶水很普遍。叫做砂石胶水。

适用于各类石材间的粘接或修补石材表面的裂缝和断痕,常用于各类型铺石工程及各类石材的修补、粘接定位和填缝。

石英砂石胶粘接注意事项:

1、不要将混合后剩余胶水放回罐内;

2、置于阴凉处,密闭桶盖保存;

3、不宜在潮湿的场所中施工,注意通风,空气湿度过大会导致胶体表面粘手;

4、施工温度不能低于零下10摄氏度和高于40摄氏度,产品分为冬季配方和夏季配方;

5、硬化剂的加入量超过4%,可能会引起胶体的变色,并降低粘接性能;

hiv胶体金法使用方法

不是

试纸一般是胶体金法的,只能用于定性的初筛。

化学发光法是定量检测,准确度高太多数量级了,但是收费也高

最准的应该是PCR方法,分子级别的。

胶体金法怎么使用方法

hiv胶体金标法即使用免疫胶体金或硒快速实验的方法进行检测hiv抗体。这种方法所用的试剂比较稳定,可在室温条件下长期保存。

使用该方法来进行血检时不需要特别的实验环境,也不需要加入任何特别的试剂。

可用于全血、血清、血浆标本检测,结果显示符号明确、操作简便,反应迅速有较好的稳定性、特异性和灵敏度,适用于应急检测和门诊急诊的个体检测。

目前我国已经有被国家食品药品监督管理局批准的国外进口试剂和国内产品,这种检测方法一般可以在十—三十分钟内来判读检测结果,但准确度要比ELISA稍低且价格偏高。

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