96孔培养板作用(96孔板培养基)
96孔板培养基
1、一般96孔板,每孔是加100微升细胞悬液，从孔的左边靠近底部加入，加完半边板后，将未加的细胞悬液混一下再，继续加剩余的半边板子，都加完后盖上盖子，左手轻轻扶住板的左边，右手轻轻敲击板的右边缘，注意把握力度（一般轻巧敲三下），太强或次数太多会导致细胞集中成堆，将板顺时针旋转（逆时针效果不好），依次敲击剩余三个边，静置约5分钟，放入37度培养箱。
6孔板12孔板或24孔板，均采用将第一个孔加入少量无血清培养基，晃动浸润整个孔底，然后用移液枪吸至第二孔，同样方法浸润孔底，其它孔一次类推，这样整个孔底都是湿润的，细胞悬液会平铺在整个孔底，加细胞悬液的时候可以避免加在中间中间细胞多，而加在周边晃匀后周边细胞多中间少的现象，细胞分散较均匀，注意加完细胞悬液后要放工作台静置一下。这个方法就是有点慢，但操作熟练了也不慢。也可以采用轻拍的方式，但力度没有96孔板好掌握，效果没有96孔板好，所以我放弃改用浸润孔底的方法。
2、细胞悬液加完后，将细胞培养板抬高，对着灯光，从底部往上看，看细胞有没有抱团。然后从底部敲击，使之分散。
3、如果实验室有平板振荡器的话，我建议用这个仪器稍振荡一下，效果不错，就是振幅小，频率高的那种。
4、细胞要尽量打散，大部分呈单个状态。离心后，要充分悬浮！还有转移到六孔板后，是要晃得！晃的时候最好不要让那个细胞液转圈，不然细胞就全被带到中间去了，就会不均匀！
5、一瓶细胞长满后，正常处理，在培养瓶里吹匀，然后铺6孔板，每孔2毫升，铺完之后不用观察直接用酒精棉擦拭，然后放到培养箱里，轻微的左三圈 右三圈 前三圈 后三圈。基本上24小时之后观察 每孔的细胞都会很均匀。
6、计算好所需要的全部液体量和细胞量，混匀后，加到六孔板里，六孔板按横8字型晃，显微镜下观察，如果不均匀，按上述方法再晃。如果细胞未计数直接种的话，在种六孔板的过程中，随时晃一下混匀用的瓶子，瓶子我通常是顺时针或逆时针转圈。
7、放在水平板面上先上下移动，再左右移动，每个方向5到6次，但关键的是摇完后最好直接放入培养箱中，不要再做过多的运动，例如放到镜下去看，否则很容易就又聚到中间去了。
96孔板放多少培养基
6孔板面积要大
6孔板底面积9.6cm；培养液2.5ml；
12孔板底面积4.5cm；培养液2ml；
24孔板底面积2cm；培养液1ml；
96孔板底面积0.32cm；培养液0.1ml。
孔板流量计又称为差压式流量计，是由一次检测件(节流件)和二次装置(差压变送器和流量显示仪)组成，广泛应用于气体、蒸汽和液体的流量测量。具有结构简单，维修方便，性能稳定，使用可靠等特点。
96孔板多少培养基
6孔板底面积9.6cm；培养液2.5ml；
12孔板底面积4.5cm；培养液2ml；
24孔板底面积2cm；培养液1ml；
96孔板底面积0.32cm；培养液0.1ml。
孔板流量计又称为差压式流量计，是由一次检测件(节流件)和二次装置(差压变送器和流量显示仪)组成，广泛应用于气体、蒸汽和液体的流量测量。具有结构简单，维修方便，性能稳定，使用可靠等特点。
96孔板培养基的蒸发作用
先用PBS洗，把培养基洗干净。用0.1%的胰酶放在37度CO2 培养箱消化几分钟。之后把板子拿出来轻轻拍下，细胞就消化下来了。
然后你在板子里加含有10%血清的培养基中和胰酶，之后吹打几次细胞，这样细胞就吹散成单细胞了。
如果你想直接染色，你可以现在板子里先放一片盖玻片（先用酒精泡，然后火上过一下），然后把细胞铺在板子里，等细胞在盖玻片上铺好了（最好过24h后）你就可以染色了。
染色完后可以把盖玻片夹出来，倒扣在事先加好封片剂的载玻片上，这样直接就可以在显微镜下看了。
96孔板培养基加多少
最多加到3mL,800uL即可覆盖底板。一般根据培养时间常使用1-2mL。
96孔板培养基可以倾倒吗
96孔板每个孔0.25ml
因为96孔板每一孔250μl。而1ml又等于1000μl。所以96孔板每一孔是0.25ml
通常每一孔不少于100μl，每毫升不少于104个细胞！
所以每一孔≥26个细胞，具体放多少根据自己需求，有的是每一孔放一个细胞。
96孔板培养基蒸发问题
空气为热不良导体,在灭菌过程中其温度会严重迟滞,造成灭菌局部失败。
水蒸气可以穿透棉塞及牛皮纸等,如果是橡胶塞或者铝箔纸上面应该有呼吸孔。
高压蒸汽灭菌，用高温加高压灭菌，不仅可杀死一般的细菌、真菌等微生物，对芽胞、孢子也有杀灭效果，是最可靠、应用最普遍的物理灭菌法。主要用于能耐高温的物品，如培养基、金属器械、玻璃、搪瓷、敷料、橡胶及一些药物的灭菌。
六孔板多少培养基
六孔板每个孔加2ml
25平方厘米的培养瓶加5ml
75的加15
175的加30
不同细胞可能长满细胞数是不同的，对于同一种细胞，你可以计数几次，以后就可以大致知道有多少。但是一般做实验种细胞的时候都会计数，虽然不是很准确，这是个精度的问题，但是它保证了基本每次的都在一个数量级，不至于相差太离谱。一般组织块原代培养时用培养瓶，长出的细胞传代后就可以依个人喜好而定了，用培养瓶或培养皿都可以，只要注意无菌操作都是没问题的。
96孔板每个孔加多少培养液
24孔板每个孔0.5ml
一般来说，我们养细胞的时候，6孔板中每孔加2ml培养基，12孔加1ml，24孔加0.5ml，96孔加100ul。
一般来讲看你细胞的增殖周期，如果周期长的话，加一毫升也未尝不可。如果太少了可能会营养不良。所以以我觉得细胞培养的多少不是主要问题。
6孔板 培养基
1、老方法：植板后，用手拿起96孔板，左右摇动，然后来回摇动几次，但这种方法通常在2-3个细胞的5口井中分布不均匀。 在大多数情况下，中间的孔会出现成堆的分布，会让人感到一阵麻烦。 再一次，看到一位老师将电路板放在振动器上并摇动几分钟。 结果更糟。 细胞都在中间。
通常，会在96孔板的每个孔上，加入100微升的细胞悬浮液。把它从左边加到洞底。加入一半板材后，与未加入的细胞悬浮液混合，然后继续加入剩余的一半板材。盖上盖子后，用左手轻轻握住木板的左边，然后用右手轻拍木板的右边缘。注意力集中在力量上(通常敲击它三次)。太多或太多次会导致细胞堆积。顺时针转动盘子(逆时针方向不好) ，将剩下的三面逐一拍打，静置5分钟左右，然后放入37度的培养箱中。
2、新方法：这种方法是非常好，非常均匀播种。使用等速吸引吸取细胞，然后吸移嘴对孔(注意尖不接触孔枪头底部)的侧壁上，然后再慢慢敲除细胞吸管定植后，不要摇晃板，它只是可以直接在显微镜下被放置，这个方法可以被说成是有效的。
补充：从6孔板到96孔板，细胞应均匀分布分散。用培养基进行稀释细胞，然后将培养板放置在适当的位置。添加一个细胞时和之后，请勿移动能力培养板；如果在空气中没有介质吹入，但是不要移动培养板，加入细胞后，静置20-30分钟，然后可以将其移入培养箱。这样，细胞结构通常具有均匀生长。当然，前提是细胞消化系统良好。
96孔板培养基体积
所加培养液的液面不宜太深,一般在2-3mm范围,结合孔的底面积就可算出适宜加液量.若加液量过多会影响气体（氧气）交换,而且在搬动过程中易溢出造成污染.